МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА НАЛИЧИЕ ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ[6]

Гельминтокопроскопические методы исследования животных | Ветеринарная медицина

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА НАЛИЧИЕ ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ[6]

Гельминтокопроскопия (от греческого слова helmins – червь, kopros – кал, навоз, skopeo – смотрю) – совокупность методов взятия, обработки и исследования проб фекалий животных и человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов или же самих паразитов, их фрагментов (членики, отрезки) и постановки диагноза.

Методы исследования направленные на отыскание самих паразитов и их отдельных фрагментов называется гельминтоскопией. Яйца гельминтов обнаруживают гельминтоовоскопическими, а личинок гельминтоларвосколическими методами

1. Порядок взятия и доставки материала для исследований

Фекалии у животных берут либо из прямой кишки, либо с земли (или пола) в зависимости от вида гельминта в количестве 4-10 г. При взятии их из прямой кишки на руки надевают тонкие резиновые перчатки или напальчники.

При исследовании на кишечные стронгилятозы и легочные гельминты (особенно при диктиокаулезе) фекалии нужно брать только из прямой кишки во избежание загрязнения исследуемого материала личинками свободно живущих гельминтов.

Допустимо отбирать пробы с пола, когда исследования проводят на заболевания, при которых го яиц не выходят личинки (фасциолез, дикроцелиоз, мониезиозы, аскаридиозы и т.д.).

У крупного рогатого скота, лошадей, собак фекалии берут индивидуально, указывая кличку и номер животного. У свиней, овец, оленей, кроликов и пушных зверей не всегда удается индивидуальное взятие проб, у этих животных фекалии чаще берут групповым методом, при этом указывают группу, отару, № станка и клетки.

Исследуют не менее 10% животных отары, фермы, хозяйства. Доставляют пробы фекалии в стеклянной, пластмассовой таре, целлофановых мешочках или пергаментной бумаге с обязательной описью проб в сопроводительном документе.

При этом указывают, хозяйство, отделение, бригаду, участок, ферму, вид животного, их возраст, на какие гельминты исследовать, дату взятия и направления материала.

Клички, номера животных, станка, клетки должны соответствовать номеру пробы фекалий на упаковке.

2. Методы гельминтоскопии

Гельминтоскопию применяют для обнаружения в исследуемом материале половозрелых и юных гельминтов или их фрагментов. Гельминты нередко отходят сами.

А у цестод некоторых групп систематически отторгаются членики и фрагменты (отрезки) стробилы с яйцами и выделяются наружу.

Исследуя фекалии животных невооруженным глазом можно заметить гельминтов или их фрагменты и членики, а иногда приходится использовать специальные методы исследования.

Особое значение гельминтоскопия имеет при цестодозах, а также при диагностической дегельминтизации.

С целью обнаружения члеников имагинальных цестод осматривают свежие фекалии. У овец, северных оленей, телят, лошадей члеников цестод нетрудно заметить при обычном осмотре.

В фекалиях ягнят и овец рано утром или после дневного отдыха находят членики мониезий, тизакиезий, аветеллин и стилезий. У плотоядных животных членики цестод из отряда тениата способны активно передвигаться во внешней среде.

Поэтому необходимо осматривать свежие фекалии.

Весьма характерны по форме членики огуречного цепня ( Dipylidium caninum ) паразитирующий у собак, лисиц, песцов, енотовидных собак, кошек и других плотоядных, а также у человека. Членики этого паразита внешне напоминают огуречные семена, их легко заметить в фекалиях, выделенных инвазированными животными.

Из специальных методов гельминтоскопии практически прост и приемлем метод последовательного промывания.

2.1. Метод последовательного промывания

При проведения этого метода собирают свежие порции фекалий от животных, их кладут в сосуд, заливают водой в соотношении 1:5 и 1:10, тщательно перемешивают. Взвесь оставляют на 5 мин. для осаждения.

Затем верхний слой сливают до осадка, после чего снова заливают водой и повторяют эти операции до тех пор, пока жидкость над осадком не будет прозрачной. После надосадочную жидкость сливают последний раз, а осадок помещают в кювет или чашку Петри для исследования под лупой.

Так как одни гельминты хорошо видны на белом фоне, а другие на черном, то для более полной выборки гельминтов чашку Петри ставят то на белую, то на черную бумагу.

Гельминты выбирают препаровальной иглой или кисточкой, а затем микроскопируют для установления вида, при этом пользуются ручной, а также штативной лупой или стереоскопическим микроскопом.

2.2. Метод отсеивания

При этом методе используют набор из 2 – 4 металлических сит с отверстиями убывающего диаметра. Струей воды промывают фекалии, при этом частицы фекалий уносятся водой, а гельминты в зависимости 6 v величины задерживаются на разных ситах. Затем гельминтов выбирают и исследуют. Этим методом можно собрать гельминтов разной величины

3. Методы гельминтоовоскопии

Гельминтоовоскопия (от латинского ovum – яйцо, греческого skopeo – смотрю) объединяет группу методов исследования, с помощью которых выявляют яйца возбудителей гельминтозов.

Предложено много методов овоскопии. Но не все они заслуживают практического внимания: одни сложны по технике выполнения, при исследовании другими требуется значительное время, третьи малоэффективны. В данной работе мы приведем только те методы, которые заслуживают практического внимания.

Удельный вес яиц тяжелее обычной воды, вследствие этого яйца гельминтов, как более тяжелые частички вымываются из фекалий водой и оседают на дно сосуда с различной скоростью, в зависимости от удельного веса, Быстрее всего оседают яйца более крупного размера.

В растворах же солей высокого удельного веса яйца гельминтов наоборот всплывают (явление флотации) в верхний слой и концентрируются в нем.

На использовании этих физических закономерностей основала технология всех современных методов гельминтоовоскопии, которые подразделяются на три группы:

а) Методы осаждения (седиментации) яиц гельминтов;

б) Методы флотации яиц гельминтов;

в) Комбинированные методы (осаждения и флотации) яиц гельминтов.

3.1. Методы осаждения (седиментации)

Основаны на принципе осаждения взвешенных в жидкости яиц гельминтов, промывки осадка и исследования его.

Эти методы применяются в основном для диагностики тех гельминтозов, возбудители которых выделяют яйца с высоким удельным весом (фасциолез, дикроцелиоз, парамфистоматоз, описторхоз и др.).

Методики осаждения менее эффективны и более трудоемки, чем флотации. Это связано со сложностью отыскания яиц гельминтов в осадке взвеси.

3.1.1 . Метод последовательных смывов

Пробу фекалий весом 3-5 г кладут в стакан, вливают небольшое количество воды и размешивают палочкой или пинцетом до получения жидкой кашицеобразной массы, затем добавляют воду порциями до объема 50 мл при постоянном размешивании; После взвесь процеживают через металлическое сито или марлю в другой стакан, в нем отстаивают в течение 5-10 мин.

Затем верхний слой жидкости над осадком сливают, а к осадку добавляют новую порцию воды и вновь отстаивают в течение 5 – 10 мин. Описанная процедура повторяется до тех-пор, пока вода не станет прозрачной. Ее в последний раз сливают, а осадок (около 5 мл) разливают на предметные стекла или стекла большего размера (12×19) и микроскопирутот.

Эта методика широко применяется в ветеринарных лабораториях для диагностики фасциолеза, дикроцелиоза, парамфистоматоза, эуриггрематоза и других гельминтозов жвачных. Вместе с тем, она трудоемка и по диагностической эффективности значительно уступает специальным флотационным и комбинированным методам гельминтоовоскопии.

3.1.2. Метод Горшкова.

Этот метод предложен ял я диагностики драйшеоза и габромематоза лошадей. Основан на принципе осаждения и концентрации яиц 150-30° г фекалий помещают на металлическом сите или марле в большую воронку с верхним диаметром 15-20 см. Предварительно на нижний конец воронки надевают резиновую трубку длиной 10-15 см с зажимом на конце.

Воронку укрепляют в штативе. Фекалии разрыхляют, заливают доверху теплой водой (38 – 39°С) и выдерживают 4-24 часа. Затем зажим осторожно открывают, и жидкость выпускают в центрифужную пробирку и центрифугируют при 1500 об/мин, в течение 3-х мин. Верхний слой жидкости сливают, а осадок наносят на предметное стекло и микроскопируют.

3.1.3. Метод соскоба с перианальных складок

Эту методику применяют для диагностики оксиуроза лошадей и пассалуроза кроликов.

Из деревянной палочки или щепочки делают лопаточки (можно и спички), смачивают смесью глицерина с водой (1:1) и делают соскоб с перианальных складок с внутренней стороны хвоста в области промежности.

Соскоб переносят на предметное стекло с указанной смесью, накрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом.

3.2. Флотационные методы

Все методы флотации (от англ. Flotation — всплывание) основаны на единой физической закономерности, обеспечивающей всплытие яиц гельминтов в насыщенных, растворах солей. Для этого рекомендуются растворы различных солей, но предпочтительнее дешевых и повсеместно доступных.

Отдельные методы флотации называются по именам авторов, впервые предложивших ту или иную соль для приготовления флотационной жидкости.

3.2.1. Метод Фюллёборна

Для этой методики нужен насыщенный раствор поваренной соли, который готовят путем кипячения 400-420 г соли на 1 л воды.

Пробу фекалий весом 3 – 5 г помещают в стакан, заливают небольшим количеством флотационной жидкости, тщательно размешивают, затем добавляют 50-100 мл этого раствора и процеживают через металлическое сито или марлю в один спой в сухой, чистый стакан. Взвесь отстаивают 40-60 мин., затем прикосновением петли снимают поверхностную пленку, переносят ее на предметное стекло для микроскопирования.

Этот метод в отечественной лабораторной практике может применяться для диагностики аскаридоза, стронгилятозов и стронгилоидоза свиней, неоаскаридоза, стронгилятозов стронгилоидозов, мониезиоза,. тизанизиоза, жвачных, параскаридоза, стронгилятозов кишечника лошадей

Плотность насыщенного раствора поваренной соли невысокая — 1,18-1,20. Тогда как удельный вес яиц аскариса равен 1,10-1,14 : а у неоплодотворенных яиц — 1,26, а трихоцефалюса — 1,16-1,22.

Поэтому насыщенный раствор поваренной соли способен флотировать только масть яиц аскарид и трихоцефалюсов, по этой причине диагностическая эффективность данной методики невысокая.

Кроме того, раствор на предметном стекле быстро кристаллизуется.

3.2.2. Метод Котельникона-Хренова с аммиачной селитрой

Технология этого метода такая же, как и метода Фюллёборна, но в качестве флотационной жидкости применяется нитрат аммония (техническая гранулированная аммиачная селитра) используемый для удобрений. При приготовлении флотационной жидкости на 1 л кипящей воды растворяют 1,5 кг селитры. Плотность раствора — 1,32. Поверхностную пленку можно микроскопировать через 10 мин.

Данная методика обладает высокой диагностической эффективностью. Кроме того, гранулированная аммиачная селитра, применяемая для флотационного раствора — общедоступная дешевая соль и производится в огромном количестве как минеральное удобрение.

В лабораторной практике эта методика широко применяется для выявления яиц аскаридоза, трихоцефалеза, эзофагостомоза и метастронгилеза свиней, неоаскарндоза, стронгилятозов пищеварительного тракта, трихоцефалеза, авителлиноза жвачных, параскаридоза и стронгилятозов лошадей, токсокароза и токсаскаридоза собак, кошек, песцов, лисиц и других плотоядных, стронгилоидоза животных разных видов, аскаридиоза и гетеракидоза кур.

Недостатком этого метода является то, что флотационная жидкость из аммиачной селитры не способна поднять тяжелые яйца трематод (фасциол, парамфистом, описторхисов и др.), т.к. удельный вес этих яиц больше чем 1,3 и раствор быстро кристаллизуется.

3.2.3. Метод Котельникова-Хренова с нитратом свинца

Техника проведения этого метода аналогична методу Фюллёборна. В качестве флотационной жидкости при этом используется насыщенный раствор нитрата свинца из расчета 0,65 кг на 1 л воды. Плотность этой жидкости достигает 1,5. Применение такого флотационного раствора дает возможность диагностировать широкий круг возбудителей гельминтозов и

с его помощью легко выявляются и тяжелые яйла фасциол (удельный вес 1,31-1,35), парамфистоматат (1,33-1,38), дикроцелиумов (1,3) и еще быстрее яйца с меньшим удельным весом, аскаридат, стронгилят, метастронгилюсов, трихоцефалят, стронгилоидесов, аноплоцефаяят (мониезий), тениат, скребней (макраканторинхусов), а также капсулы тизаниезий.

Недостатком данной методики является дороговизна нитрата свинца. Вместе с тем, при работе данным препаратом петли покрываются белым налетом, (нитрат свинца входит в химическую реакцию с металлами), яйца трематод сильно деформируются, что создает определенные трудности при исследовании.

Кроме того, используемый препарат соль тяжелого металла — свинца, который является высокоядовитым веществом, что создает опасность для здоровья исследователей и окружающих, отработанные растворы данного препарата запрещено сливать в канализационные стоки.

По совокупности этих причин, указанная методика не нашла широкого применения в практике.

Кроме того, в качестве флотационных жидкостей авторами были предложены насыщенные растворы из следующих солей: нитрата натрия — 1 кг препарата на 1 л воды, р — 1,38 (метод Калантаряна), тиосульфата натрия — 1,75 кг препарата на 1 л воды, р — 1,40 (метод Болховитинова), карбоната калия — 0,6 кг на 1 л воды, р — 1,41 (метод Вольфа). Однако все эти методы по тем или иным причинам также не нашли широкого применения в практике.

Скачать реферат

Источник: https://www.allvet.ru/referats/50/

Методы исследовании объектов окружающей среды на наличие паразитов

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА НАЛИЧИЕ ЯИЦ ГЕЛЬМИНТОВ[6]

Методы исследовании объектов окружающей среды на наличие паразитов

Определение семейств насекомых отряда пухопероедов (по Н. Н. Плавильщикову)

В современный период обострения экологических проблем важное значение приобретают вопросы охраны природы. Тем более, что в наше время воздействие человека на природу приобретает огромные размеры и нередко оказывает отрицательное влияние.

Среди составных его немаловажное значение имеет биологическое загрязнение среды вирусами, бактериями, яйцами и личинками гельминтов, вредными насекомыми, клещами и т. д. Для контроля зараженности окружающей среды возбудителями паразитозов существует ряд методов исследований.

Некоторые из них будут изложены ниже.

Исследование на наличие гельминтов проб почвы, воды, травы и навоза

Исследование проб почвы. С целью определения загрязненности яйцами и личинками гельминтов почвы ее берут около помещений, на пастбищах, прогонах и в других местах на глубине до 15—20 см. С каждого участка через каждые 10 м берут около 50 г почвы, перемешивают ее и со средней пробы отбирают 100 г почвы.

A. И. Корчагин (1984) с целью выявления в почве или в соскобах с твердых покрытий животноводческих помещений яиц аскаридат или стронгилят предлагает из отобранных образцов брать по 15—25 г почвы, а в качестве флотационной жидкости применять раствор нитрата аммония плотностью 1,3 или нитрата натрия плотностью 1,38.

Пробу почвы помещают в центрифужную пробирку емкостью 250 мл, добавляют 100 мл 3%-ного раствора едкого натрия, перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 3—5 минут со скоростью 1000 об/мин.

После этого надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 150 мл воды, опять хорошо перемешивают и повторно центрифугируют.

Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 150 мл раствора нитрата аммония, перемешивают и фильтруют через капроновое или металлическое ситечко с размерами ячеек 0,5х0,5 мм в другую пробирку и опять центрифугируют.

После этого пробирки со смесью ставят в штатив и в каждую из них доливают раствор нитрата аммония до уровня ниже края пробирки на 2—4 мм. После этого берут предметные стекла размером 6х6 см, покрывают ими пробирки, в которые пипеткой добавляют раствор нитрата аммония до соприкосновения его с нижней поверхностью стекла. Через полчаса стекла снимают и подсчитывают количество яиц гельминтов в пробе.

При исследовании соскобов пробу берут в количестве 15—25 г с разных мест пола, нижних участков стен, перегородок через каждые 5 м. Для исследования соскобов применяют те же флотационные растворы и аналогичные подходы, что и при исследовании почвы.

Для выявления в почве личинок нематод применяют метод Бермана. С этой целью 30—40 г почвы помещают на молочные фильтры в воронки аппарата Бермана, заполняют теплой водой (40 °С). Через 3—4 ч содержимое переливают в пробирки, центрифугируют 1 —2 минуты со скоростью 1000 об/мин, верхний слой жидкости в пробирках сливают, а осадок микроскопируют.

Исследование проб навоза на наличие яиц и личинок гельминтов проводят теми же методами, что и исследование почвы, но при исследовании навоза на наличие яиц гельминтов пробы фильтруют через металлические ситечки, чтобы крупные частицы не мешали при микроскопировании поверхностной пленки.

https://www.youtube.com/watch?v=SmJgK4rZCOg

Жидкие и плотные фракции навоза на наличие яиц гельминтов исследуют по модифицированному методу А. А. Черепанова (1972). Из плотной фракции отбирают 100 г навоза, из жидкой фракции — 0,5 кг. Пробу плотной фракции навоза смешивают с небольшим количеством воды, растирают в ступке и фильтруют через марлю под напором струи воды из водопровода.

Фильтрат помещают в пробирки и центрифугируют 3 мин со скоростью 1500 об/мин. Надосадочную жидкость в пробирке сливают, а к осадку добавляют раствор нитрата натрия или аммиачной селитры и повторно центрифугируют. После этого в пробирки наливают доверху флотационный раствор, покрывают предметными стеклами и через 20-25 минут их микроскопируют.

После фильтрации жидкую фракцию навоза исследуют аналогичным образом.

Методика Н. А. Акулина для исследования травы на выявление личинок стронгилят.

Перед началом исследований готовят оборудование: тазы диаметром 36 см и высотой 15 см; стеклянные воронки диаметром 20 см, к которым прикрепляются пробирки с помощью резиновых трубок; штатив для воронок; микроскопы; сита диаметром 31 см с высотой боковой стенки 12 см, размер ячеек сетки сита 1 мм; глазные пипетки, предметные стекла, раствор Люголя.

Отбирают пробы травы по 100—120 г и помещают их в сито. Его ставят в таз с теплой водой (22—24 °С). Между сеткой сита и дном таза должно оставаться расстояние в 5—7 см.

Через 24 ч сито с травой вынимают из таза, а через полчаса воду из таза осторожно сливают, оставляя осадок в количестве примерно 1,5 л. После этого в штатив вставляют воронки с прикрепленными к ним пробирками и в воронки выливают осадок из таза, перед этим хорошо перемешав его.

Через 2 ч пробирки от воронок отделяют и осадок в них исследуют с помощью микроскопа. При необходимости обездвиживания личинок применяют раствор Люголя, добавляя одну каплю его к капле исследуемой на предметном стекле жидкости.

В пастбищный сезон для выявления личинок диктиокаул траву рекомендуется исследовать один раз в неделю, а для обнаружения стронгилят желудка и кишечника жвачных — через каждые две недели.

Исследование воды для обнаружения яиц и личинок гельминтов. При исследовании воды крупных водоемов в различных местах берут пробы в объемах от 0,5 до 10 л.

С поверхности воды пробы берут малыми емкостями — 0,5-1 л через каждые 3-5 минут, чтобы через час средняя проба составила 10 л. Из колодцев, водопровода проба воды должна быть не менее 25 л.

Целесообразно пробы воды брать в различные сроки дня и в различные периоды года для установления динамики загрязненности ее личинками и яйцами гельминтов.

Метод исследования воды по 3. Г. Васильковой (1955). Отбирают пробу воды и фильтруют ее через крупнопористые фильтры (диаметр пор 3—5 мкм). При этом задерживаются яйца и личинки гельминтов.

В ветеринарной лаборатории воду можно фильтровать через воронку Гольдмана с применением насоса Комовского. В полевых условиях применяют ручной насос, при этом за 1 ч фильтруют 10 л воды, используя 10—20 фильтров.

После этого фильтры помещают на большие предметные стекла и микроскопируют.

Для фильтрации можно применять также бумажные фильтры для исследования речной и сточной воды. При этом за 1 ч удается исследовать 2—3 л воды с применением около 50 фильтров.

Если нет фильтров, воронок Гольдмана и другого оборудования, в полевых условиях воду просто отстаивают в 10-литровой посуде, осадок сливают в пробирки, центрифугируют и исследуют.

Все описанные выше методы исследований почвы, навоза, воды и травы могут быть применены при гельминтологической оценке пастбищ при многих геогельминтозах.

Обследование пастбищ и водоемов при биогельминтозах

Заражение животных на пастбищах, в местах прогона и из водоемов биогельминтами зависит исключительно от наличия там промежуточных хозяев, а также степени их зараженности гельминтами.

В европейской части нашей страны промежуточным хозяином для фасциол служит пресноводный моллюск Galba truncatula (L. truncatula) — малый, или усеченный, прудовик. При влажности ниже 45 % малые прудовики погибают (В. В. Горохов, 1973).

Биотопы малого прудовика отличаются большим разнообразием — это небольшие лужи, мочажины, неглубокие болота, пруды и т. д. Плотность его на 1 м2 колеблется от единичных экземпляров до нескольких сотен. Биотопы малого прудовика могут быть постоянными или временными.

Малый прудовик предпочитает поселяться на богатых гумусом почвах, хорошо освещенных солнцем. Как правило, его нет в водоемах на глубине более 20 см или он там встречается редко.

Малый прудовик откладывает яйца на остатках растительности, на кусках дерева, на камнях или просто на влажной почве, даже в самой воде. В каждой кладке одного моллюкса содержится от 4 до 30 яиц. Подсчитано, что за 16 дней один такой моллюск может отложить до 400 яиц (S. В. КешМ1, 1953).

Молодые особи выходят из яиц через 10-32 дня после их откладки (в зависимости от температуры и влажности), а половозрелыми моллюски малого прудовика становятся через 21-63 дня после вылупления из яиц.

При благоприятных условиях уже во второй генерации потомство одного моллюска малого прудовика может достичь 160 тыс. экземпляров (Е. Е. Шумакович, 1973).

В условиях Беларуси и Нечерноземной зоны России яйцекладка малого прудовика может проходить с мая по сентябрь, в течение этого времени каждый моллюск откладывает яйца 2-3 раза. Считают, что срок жизни малого прудовика от года до 4 лет.

На наличие моллюсков малого прудовика осматривают прибрежную часть водоемов, берега, растительность, дно у берега водоемов на глубину до 20 см. Определяют плотность популяции из расчета на 1 м2.

Обследование пастбищ проводят в теплое время года при температуре не ниже 20 °С. Особое внимание необходимо уделять низменным местам, заросшим травой.

Отобранных в биотопах моллюсков определяют до вида.

Исследование некоторых промежуточных и резервуарных хозяев на наличие гельминтов

Моллюски могут принимать участие в развитии трематод, некоторых цестод и нематод.

Для исследования моллюска освобождают от раковины, помещают в чашки Петри, расчленяют на отдельные части и микроскопируют с помощью компрессория.

Малых прудовиков, планорбид и других мелких моллюсков исследуют, не снимая раковин. При микроскопии в поле зрения можно найти трематод в различных стадиях развития — спороцисты, редии, церкарии, метацеркариев.

Для исследования малого прудовика — промежуточного хозяина фасциолы обыкновенной из каждого биотопа берут не менее 100 экземпляров. Для более точного определения степени инвазированности моллюсков гельминтами исследуют из каждого биотопа 300-400 экземпляров.

Этот моллюск имеет коническую тонкостенную раковину серовато-желтого цвета с 5-6 выпуклыми оборотами. Устье моллюска яйцевидное, высота раковины—до 10 мм.

Моллюска исследуют полностью или отрезают верхушку раковины, где расположена печень с развивающимися в ней личинками: спороцистами, редиями и церкариями.

Спороциста — первая стадия партеногенетического развития трематод. Образуется она чаще в печени моллюска из проникшего в него мирацидия. Спороцисты трематод бывают различны по форме, у фасциол они веретенообразной формы с закругленными концами.

Стенки их тонкие, пищеварительной системы нет, внутри они заполнены клетками. При оптимальных условиях развития внутри спороцисты уже на 8-й день появляются редии.

Спороцисты без редий обнаружить трудно, так как они небольшие по размеру (0,1—0,2 мм) и неподвижны.

Редия является второй стадией партеногенетического поколения трематод. После созревания в спороцисте редии разрывают ее оболочку и находятся в основном в печени. Форма тела у редий сигарообразная. Они имеют ротовое отверстие, глотку, кишечник, а также выделительную систему.

Сформировавшиеся молодые редии фасциол имеют длину до 0,47 мм, 13-дневные—0,63мм, 19-дневные—до 1,5мм. Внутри молодых редий находятся зародышевые клетки, из которых затем вырастают или дочерние редии, или церкарии. При благоприятных погодных условиях церкарии могут обнаруживаться уже в 24-дневных редиях.

Молодых редий фасциол, как и спороцист, нельзя дифференцировать от редий других трематод.

Церкарии после созревания выходят из редий через «родильное отверстие». В зрелом возрасте церкарии фасциолы обыкновенной молочного цвета. Он состоит из двух обособленных отделов —переднего (овального) и заднего — хвостового придатка.

Тело церкария размером 0,22—0,35х0,17—0,22 мм имеет ротовую и брюшную присоски, глотку, кишечник и цистогенные железы. Длина хвоста церкария 0,25—0,55 мм. После пребывания в воде 30—40 минут хвосты у церкариев отпадают и они превращаются в адолескариев.

Несмотря на то, что отдельные виды трематод развиваются только в моллюсках определенных видов, многие моллюски являются промежуточными хозяевами одновременно для ряда трематод.

В связи с этим в них могут быть обнаружены разные церкарии, которых необходимо отличать друг от друга по характерным морфологическим признакам.

Исследование катушек планорбид проводится с целью обнаружения в них личинок парамфистоматид. Установлено, что в хозяйствах Беларуси промежуточными хозяевами парамфистоматид являются моллюски Р1агкн4ш planorbis, Anisus уойех и др.

Они находятся в мелиоративных каналах, в небольших водоемах, богатых травянистой растительностью с дерново-глеевыми и пе-регнойно-иловато-глеевыми почвами (рН 5,2—5,5).

Плотность их составляет от единичных экземпляров до 75 (и более) на 1 м2 поверхности биотопа.

Катушек исследуют с помощью компрессория. При этом личинок парамфистоматид можно обнаружить как в самом моллюске, так и в жидкости, вытекающей при раздавливании их между стеклами компрессория.

С апреля до первой половины июля обычно проводят исследование взрослых перезимовавших моллюсков, так как в молодых моллюсках церкариев парамфистоматид можно обнаружить лишь с середины июля до октября. Из одного биотопа вскрывают и исследуют не менее 100—200 моллюсков.

В катушках можно обнаружить церкарии различных трематод, поэтому церкариев парамфистоматид необходимо уметь отличать от остальных гельминтов.

Церкарии парамфистоматид темно-коричневого цвета, тело овальной формы, сплющенное, размером 0,21-0,45х0,17-0,30 мм. Передний конец тела оттянут и притуплен, задний более широкий и закруглен.

На переднем конце личинки располагается фаринкс, по бокам основания которого находятся два черных глазка треугольной формы. В месте прикрепления к телу хвоста располагается брюшная присоска круглой формы.

Длина хвоста составляет 0,59—0,75 мм.

Наземные моллюски исследуются с целью обнаружения в них личинок дикроцелий, эуритрем, протостронгилид и др. На территории европейской части России промежуточными хозяевами для дикроцелий (D.

сеайнп) являются следующие виды моллюсков семейства НеНшйае: НеНсеШ саш, licopsis instabilis, Monacha cartusiana, Моnасhа truticicola, Рsеudotrichia rubidinosa, Enomphalia strigella и др.

, а также некоторые моллюски семейств Вгаgуbаеnidае, Сосh1icopidaе, Zonitidae, Gimacidaе, Еnidае и др.

Инвазированность мелких моллюсков личинками дикроцелиев определяют при раздавливании их между стеклами и микроскопированием препаратов. Крупных моллюсков исследуют после освобождения их от раковин и извлечения пищеварительной железы.

Последнюю помещают в каплю воды на предметное стекло, измельчают и микроскопируют. При этом необходимо обнаружить материнские и дочерние спороцисты или церкарии. Последние представляют собой овально-удлиненной формы личинку с длинным хвостом.

Зрелых церкариев обнаруживают в моллюсках чаще в весенне-летний период.

В моллюсках церкарии проникают в их дыхательную полость, покрываются клейким слизистым веществом, образуя слизистые комочки, в которых содержится до 200 церкариев и более. Из тела моллюска слизистые комочки выталкиваются и прилипают к растениям.

Муравьи находят слизистые комочки с церкариями дикроцелий и охотно их поедают. В теле муравья церкарии мигрируют в его брюшную полость, покрываются цистой и превращаются в метацеркариев. Для заражения животных дикроцелиями необходимо, чтобы муравьи с метацеркариями этих гельминтов попали в организм.

В связи с этим для гельминтологической оценки пастбищ на дикроцелиоз необходимо провести исследование муравьев. Для этого отыскивают и устанавливают зараженность не всех собранных муравьев, а только тех, которые находятся в состоянии «оцепенения».

Насекомых помещают в пробирку и на 3-5 минут кладут туда ватный тампон, смоченный эфиром. Затем на предметном стекле препаровальными иглами у муравьев вскрывают брюшко и просматривают под микроскопом или лупой на наличие метацеркариев. Они бывают видны заключенными в цисту длиной 0,28—0,4 и шириной 0,2—0,26 мм.

В одном муравье может находиться от единичных до 350 метацеркариев и более.

Исследования панцирных клещей из родов Schelozibates, Zygoribatula, Сеrаtozetеs и др. проводятся с целью обнаружения личинок мониезий и других цестод из семейства Акантоцефалид.

Для этого берут поверхностный слой почвы и с помощью аппарата Тульгрена выделяют орибатид. Клеща помещают на предметное стекло в каплю воды, панцирь его расщепляют иглами, покрывают покровным стеклом и микроскопируют.

Цистицеркоид мониезий представляет собой шаровидное образование диаметром 0,16—0,20 мм, в центре которого находится сколекс с присосками.

Обследование объектов внешней среды для обнаружения клещей и паразитических насекомых

Обследование пастбищ для обнаружения иксодовых клещей. На деревянный стержень длиной 100 см прикрепляют кусок марли или ткани размером 60х80 см и медленно обеими сторонами проводят по траве или мелкому кустарнику обследуемого пастбища. После этого марлю или ткань осматривают и собирают клещей.

Для сбора иксодовых клещей можно пользоваться также специальным экраном, представляющим собой легкую деревянную раму размером 180-200х80-100 см.

С одной стороны раму затягивают белой бязью, разграфленной на восемь – десять поперечных полос на равном расстоянии одна от другой.

Один человек проносит экран в вертикальном положении через заросли, второй наблюдает за экраном и снимает прикрепившихся к нему клещей, которых затем исследуют или консервируют.

Исследование иксодовых клещей на наличие пироплазматид проводят по методу А. А. Цапруна и А. А. Маркова. Отбирают самок клещей, умерщвляют их хлороформом или эфиром, затем проводят через 96°-ный этиловый спирт.

В чашку Петри, дно которой покрыто парафином, наливают физиологический раствор и переносят туда клещей. С помощью ножниц отсекают задний край брюшка клеща, а затем разрезают наружные края брюшка.

После этого клеща прикрепляют к парафину тонкими булавками, препаровальной иглой приподнимают задний край его хитиновой покрышки, пинцетом отводят ее вперед и отсекают ее у основания хоботка.

По бокам передней части тела клеща располагаются слюнные железы, их отделяют от трахей, жирового тела и органа Жанэ, помещают на обезжиренное предметное стекло в каплю воды и размельчают препаровальной иглой до получения мелкой суспензии. Из нее готовят тонкий мазок, тщательно его высушивают (в термостате при 37 °С в течение 3 ч, при комнатной температуре — 12ч) и фиксируют метиловым спиртом 10 минут. Окраску мазков проводят по Романовскому-Гимза или по Нохту.

При микроскопировании препаратов пироплазматид находят в виде образований овальной, округлой, грушевидной или червеобразной формы, в которых хорошо видны ядро и протоплазма.

Исследование гемолимфы иксодовых клещей для обнаружения пироплазматид проводят по методу И. В. Абрамова. Для этого самку клеща обмывают дистиллированной водой и высушивают фильтровальной бумагой. Затем ножницами отрезают одну конечность.

При этом выступает капелька гемолимфы, которую наносят на обезжиренное предметное стекло и делают мазок. Его высушивают, фиксируют 10 минут метиловым спиртом, красят по Романовскому-Гимза и микроскопируют с использованием иммерсионной системы.

Методы обнаружения аргасовых и гамазовых клещей. Для обнаружения аргасовых и гамазовых клещей в птичниках собирают остатки сухого корма, пыль из трещин в банки с притертыми пробками. После этого небольшими порциями собранный материал помещают на чашку Петри и подогревают на спиртовке. Выползших клещей собирают влажной кисточкой и микроскопируют.

Для обнаружения клещей можно применять и метод флотации.

С этой целью небольшое количество сора из птичника или из гнезда (5—10 г) помещают в стеклянный цилиндр емкостью 200 мл, заливают водой, тщательно перемешивают и отстаивают.

С поверхности удаляют всплывшие посторонние частицы, воду осторожно сливают, а осадок помещают в пробирку и центрифугируют при 1500 об/мин 1—2 минуты. Жидкость из пробирки сливают, а осадок микроскопируют.

Сбор орибатидных клещей. Применение аппарата Тульгрена для сбора орибатидных клещей. Вначале собирают аппарат Тульгрена. Для этого берут крупную стеклянную воронку, к узкому концу которой с помощью резиновой трубки прикрепляют пробирку. Раструб воронки затягивают марлей или покрывают металлической сеткой с мелкими отверстиями.

На марлю или сетку помещают исследуемый материал (пробу травы, почвы, мха и др.). Аппарат укрепляют в штативе и на расстоянии 20—25 см от пробы материала помещают электролампу мощностью 100 Вт, постоянно освещающую пробу.

В результате подсыхания и под действием света орибатидные клещи выползают из исследуемой пробы, проваливаются через отверстия марли или сетки и попадают в пробирку.

Через 1—2 суток пробирку снимают, а клещей помещают на предметное стекло и микроскопируют.

Метод С. Н. Никольского. Почву или дерн размером 10х10х2 см после тщательного измельчения просеивают через ряд сит.

Наиболее мелкую часть отсева насыпают тонким слоем в часовые стекла, которые перед этим ставят в наполненные водой чашки Петри и в таком виде выставляют на хорошо освещенные подоконники.

Под влиянием света орибатидные клещи выползают на край часовых стекол и сваливаются в воду, из которой их извлекают акварельными кисточками, помещают на предметное стекло и микроскопируют.

Сбор паразитических насекомых в помещениях и на пастбищах. Мух-жигалок вылавливают с помощью пробирок, энтомологических сачков или мухоловок. В помещениях они встречаются на протяжении всего лета, но больше всего в августе и сентябре.

Мухи других видов чаще встречаются в летнее время возле животноводческих помещений, навозохранилищ, мусорных ям и т. д. Они предпочитают теплые и освещенные поверхности. После отлова мух умерщвляют в морилке, накалывают на энтомологические булавки или же помещают в склянки с притертой пробкой, куда перед этим наливают 70°-ный этиловый спирт.

Комаров в помещениях отлавливают в различных затемненных местах, а также на окнах, стенах, потолках. Зимой их можно обнаружить в теплых подвалах, погребах, животноводческих помещениях. Их отлавливают с помощью пробирки, после чего помещают в нее ватный тампон, смоченный хлороформом или эфиром.

На пастбищах насекомых отлавливают с помощью энтомологического сачка, который представляет собой мешок длиной 75—100 см, натянутый на обод диаметром 30—35 см и укрепленный на деревянную палку длиной 1,2—1,5 м. Мешок обычно делают из марли.

Энтомологическим сачком кроме мух и комаров отлавливают также слепней. Их обычно находят в местах, заросших кустарником или тростником, возле водоемов, на опушках леса. Отлов их производят также возле животноводческих помещений или летних лагерей для животных.

Следует учитывать, что лет слепней наблюдается с конца мая до августа — сентября при температуре воздуха более 15°С. Особенно интенсивным лет слепней бывает в жаркие и безветренные дни.

Умерщвленных в морилке слепней помещают в бумажные коробочки и в дальнейшем высушивают.

Применять для консервации слепней спирт, эфир, хлороформ или другие жидкости не следует, так как потом невозможно определить их вид.

Оводов подкожных и желудочных также можно отлавливать с июня до сентября энтомологическим сачком в теплые безветренные дни, когда температура достигает 16—18°С и более. Полостных оводов овец собирают утром руками с помощью ловчего цилиндра или пробирками на стенах животноводческих помещений, на ограде или скирдах сена в безветренную солнечную погоду.

Личинок полостных оводов различных стадий развития можно извлечь из носовой полости животного с помощью различных лекарственных веществ.

Для этой цели можно применять также марлевые тампоны, пропитанные смесью лизола и глицерина (1:50).

Тампоны прикрепляют к эластичному пищеводному зонду и вводят в глубь носовой полости, проводя легкие продольные и круговые движения им. Некоторые личинки на тампоне оседают и их извлекают из носовой полости животного.

Подробности Раздел: БОЛЕЗНИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ

Источник: http://ZooVet.info/vet-knigi/107-zyvotnovodstvo/bolezni-zh-kh/6308-metody-issledovanii-ob-ektov-okruzhayushchej-sredy-na-nalichie-parazitov

Medic-studio
Добавить комментарий