ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой (но не стеклянной

Содержание
  1. Соскоб на энтеробиоз: как взять мазок у детей и взрослых в домашних условиях или поликлинике, результаты анализов и сколько дней действительны
  2. Показания к обследованию
  3. Анализы
  4. Правила подготовки
  5. Результат
  6. Взятие биоматериала
  7. Липкая лента
  8. Алгоритм взятия мазка на энтеробиоз
  9. Правила забора материала
  10. Глава III. Диагностика гельминтозов (Василькова, 1953г) – Диагностер
  11. Глава III. Диагностика гельминтозов и методы гельминтологических исследований
  12. Методы исследования испражнений на гельминтозы
  13. Нативный мазок
  14. Метод Фюллеборна
  15. Таблица. Сравнительные данные о форме и размере яиц гельминтов
  16. Метод Бермана
  17. Метод Столла
  18. Исследование дуоденального содержимого
  19. Исследование мокроты
  20. Исследование тканей на цистицеркоз и трихинеллез
  21. Рентгеноскопия
  22. 2.Микроскопическое исследование
  23. Диагностика протозойных инфекций: классификация простейших, исследуемые материалы, разные методы диагностики, расшифровка результатов анализов
  24. Классы паразитов и исследуемые биоматериалы
  25. Частные виды диагностики
  26. Диагностика корненожек (амёб)
  27. Диагностика ресничных (инфузорий)
  28. Диагностика жгутиконосцев (лейшманий, лямблий, трипаносом, трихомонад)
  29. Выявление споровиков (малярийного плазмодия, возбудителя кокцидоза и пр.)
  30. Основные методы исследования простейших
  31. Диагностика простейших методом нативного мазка и мазка, окрашенного раствором Люголя (в кале)
  32. Метод консервации (исследование кала) при диагностике простейших
  33. Метод формалин-эфирного обогащения (анализ на наличие простейших в кале)
  34. Метод нахождения лейшманий (мазок костного мозга)
  35. Метод обнаружения лейшманий в мазке из кожного инфильтрата
  36. Метод выделения чистой культуры лейшманий, полученных путем соскоба патологических тканей
  37. Исследование кала метод нативного мазка
  38. Гельминтоовоскопические методы диагностики

Соскоб на энтеробиоз: как взять мазок у детей и взрослых в домашних условиях или поликлинике, результаты анализов и сколько дней действительны

ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой (но не стеклянной

Дети при заражении глистами плохо спят, капризничают и так далее. Мазок считается обязательной процедурой для детей, которые поступают в дошкольные учебные заведения, школы. Соскоб берётся и у пациентов, которые поступают на лечение в стационар, при посещении общественных мест.

Если родители заметили за ребенком симптоматику, указывающую на глистов, требуется посетить врача и сдать анализы: взятие кала, соскоба. Если посетить клинику возможности нет, то мазок на энтеробиоз у детей проводят дома.

Показания к обследованию

Медики назначают сдачи соскоба на энтеробиоз не только в качестве профилактических мероприятий, но и при присутствии явной клинической симптоматикой, указывающей на глистную инвазию. К основным признакам относятся:

  1. Зуд в области анального отверстия.
  2. Воспаления и покраснения кожи.
  3. Молочница.
  4. Воспаление мочевого канала.
  5. Вульвовагинит у детей и подростков.
  6. Метеоризм.
  7. Расстройство пищеварения.

Массовое заражение глистами приводит к патологическим изменениям. К признакам можно отнести:

  1. Повышенное газообразование.
  2. Дисбактериоз.
  3. Дисфункция желудочно-кишечного тракта.
  4. Плохое переваривание пищи.
  5. Кожная сыпь.
  6. Мигрень.
  7. Общая усталость.
  8. Бессонница.

Анализы

Соскоб на энтеробиоз подразумевает взятие биологического материала в области заднего прохода. Соскоб позволяет выявить глистов практически в 99% случаях. Взятие материала проходит в 3 этапа с перерывом на 24 часа. Поэтому врач без труда может диагностировать следующих видов паразитов:

  1. Острица.
  2. Власоглав.
  3. Широкий лентец.
  4. Цепни.
  5. Аскариды.

Техника взятия материала делится на несколько методов:

  1. Ватная палочка.
  2. Лента.
  3. Деревянный шпатель.

После того как врач обследовал пациента, дается направление на анализы. Для точной диагностики надо сдать анализ кала на энтеробиоз, при этом врач может диагностировать погибшие особи червя, личинки. Также лаборант осуществляет взятие соскоба на энтеробиоз, точность диагностики зависит от того, как больной подготавливается.

Правила подготовки

Для проведение соскоба на выявление энтеробиоза следует отправиться в медицинском учреждении по месту прописки. Если нет возможности попасть в клинику, можно осуществить взятие биоматериала в домашних условиях. При этом пациенту придется придерживаться простых правил подготовки к энтеробиозу:

  1.  Нельзя осуществлять утренний туалет до сдачи биоматериала.
  2. Мазок делают рано утром, после ночного сна.
  3. Если остриц можно диагностировать в каловых массах, дополнительно пациент сдаёт его на исследование.

Простая подготовка к сдаче соскоба на выявление энтеробиоза позволит точно диагностировать глистную инвазию и приступить к корректировке.

Результат

После сдачи биоматериала на исследование расшифровку больной получает на следующий день. Если у пациента диагностирован отрицательный результат, это не даёт гарантию 100%, что в организме нет глистов. Соскоб требуется сдавать пару раз с интервалом в 1 день. Только так можно получить точные результаты.

Медики рекомендуют проводить соскоб 3 раза, после медикаментозного лечения процедура сдачи повторяется. Если пациент соблюдает правила личной гигиены, можно избавиться от инвазии, снизить риск рецидива. Дополнительно рекомендуется принимать слабительные препараты или очистительные клизмы.

Профилактически рекомендуется проводить анализ детям каждый год. Это позволяет своевременно выявить гельминтоз, приступить к лечению.

Взятие биоматериала

Осуществляется взятие мазка на энтеробиоз у детей и взрослых можно несколькими способами. Для взятия ватной палочкой требуется соблюдать следующий алгоритм действий:

  1. Открыть стерильный контейнер и достать ватную палочку.
  2. Пациент нагибается вперёд, разводя руками ягодицы.
  3. Специалист достает палочку и круговыми движениями осуществляет забор биоматериала.
  4. Кладут материал в контейнер и закручивают плотно крышечку.
  5. Материал не хранится более 8 часов, больному как можно раньше требуется нанести его в лабораторию.

Липкая лента

Взятие материала лентой не отличается от соскоба. Рассмотрим метод взятия мазка:

  1. Больной раздвигает ягодицы, наклоняясь вперед.
  2. Лаборант прижимает ленту к анальному отверстию.
  3. Лента приклеивается к подготовленному стёклышку, направляется в лабораторию.

Точность диагностики зависит от готовности пациента к взятию биоматериала.

Диагностику глистной инвазии надо проводить у ребенка ежегодно. Дети тесно контактируют с домашними животными, не соблюдают правила личной гигиены. Поэтому и риск распространения гельминтоза высокий.

Перед соскобом надо подготовиться, от этого зависит точность диагностики. После сдачи биоматериала больной получит расшифровку, готовится результат сутки.

Источник:

Алгоритм взятия мазка на энтеробиоз

Лабораторный признак заражения острицами – обнаружение яиц паразита в материале с перианальных складок пациента. Существует определенный алгоритм соскоба на энтеробиоз, который включает правила по сбору субстанции, кратность проведения исследования и позволяет получить достоверные результаты.

Правила забора материала

Взятие мазка на энтеробиоз показано при подозрении на заражение острицами и как плановый анализ для госпитализации в стационар, получения справки в бассейн, оформления медицинской книжки.

Это исследование рекомендовано взрослым и детям. Существуют общие правила:

  1. Проведение соскоба нежелательно при нарушении целостности кожного покрова перианальной области (эрозии, нагноения, экзематозные высыпания). Следует приложить усилия к заживлению ранок и сдать анализ позже.
  2. Выбор техники исследования зависит от возраста пациента, алгоритмов, принятых в той или иной лаборатории.
  3. Накануне анализа на энтеробиоз пациент или человек, проходящий скрининг, должен принять душ, подмыться и надеть чистое белье. В день сдачи необходимо обратиться в лабораторию утром – до акта дефекации. Принимать душ, производить гигиенические процедуры нельзя: это приведет к тому, что даже при заражении острицы не будут обнаружены.
  4. На профилактических скринингах анализ на энтеробиоз берут однократно. При получении отрицательного результата считают, что человек здоров. Если пациент обращается к врачу с характерными жалобами, но первое исследование не выявляет паразита, анализ повторяют через 2-3 недели.

Источник: https://kashmu.ru/protsedury-i-manipulyatsii/kak-vzyat-soskob-na-enterobioz.html

Глава III. Диагностика гельминтозов (Василькова, 1953г) – Диагностер

ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой (но не стеклянной

книги Основные гельминтозы человека и борьба с ними (З. Г. Василькова, 1953г) смотри здесь

Глава III. Диагностика гельминтозов и методы гельминтологических исследований

При изучении клинической картины различных гельминтозов специфические явления, характерные для определенного гельминтоза и отличающие его от заболеваний иной этиологии, обычно не наблюдаются.

Поэтому точный диагноз гельминтозов не может быть поставлен на основании только клинической картины, а должен подтверждаться лабораторными методами исследования, а также собиранием сведений о выделении паразитов (аскарид, остриц) или их фрагментов (члеников тениид).

Необходимо обследовать на гельминтозы всех больных, обращающихся за медицинской помощью, и особенно больных, обращающихся к педиатру, терапевту и невропатологу с жалобами на явления со стороны желудочно-кишечного тракта, нервной системы и с анемией. Если врач не всегда может применить лабораторные методы исследования, то опросить больного о выделении у него гельминтов обязан каждый медицинский работник, оказывающий помощь в амбулатории или стационаре.

При наличии приведенных в соответствующих главах клинических показаний следует уточнить диагноз при помощи лабораторных методов исследования на гельминтозы.

Диагноз гельминтозов ставится при обнаружении паразитов, их члеников или яиц (специальные методы исследования) и при наличии реакций, вызываемых гельминтами в организме хозяина (подсобные методы).

Объектами исследования при гельминтозах являются: 1) испражнения, 2) выделенные паразиты, 3) ректальная и перианальная слизь, 4) содержимое подногтевых пространств, 5) дуоденальное содержимое, 6) мокрота, 7) кровь, 8) частицы тканей.

В связи с преобладанием кишечных гельминтозов наибольшее практическое значение имеет исследование испражнений.

Методы исследования испражнений на гельминтозы

Испражнения доставляются в лабораторию в чистой стеклянной посуде (около четверти стакана испражнений, взятых из разных мест одной порции); при плановом обследовании допускается доставка испражнений в лабораторию в спичечных или лубочных коробочках.

Для контроля дегельминтизации доставляется (по назначению врача) вся порция испражнений, собранная после приема противоглистного средства и слабительного (в больших закрытых стеклянных банках, ведрах).

Микроскопическое исследование испражнений является основным при диагностике кишечных гельминтозов; ему всегда должен предшествовать общий макроскопический осмотр фекалий для обнаружения члеников крупных цестод, остриц, аскарид и др.

Испражнения должны быть свежими или консервированными (в 5% растворе формалина), так как высыхание резко изменяет структуру яиц. Кроме того, при стоянии фекалий происходит быстрое развитие яиц некоторых гельминтов (например, анкилостом), что затрудняет диагностику.

Согласно инструкции Министерства здравоохранения СССР, необходимо исследовать испражнения одновременно по методу Фюллеборна и нативного мазка.

Нативный мазок

Нативный мазок: небольшой кусочек фекалий (с горошину), взятый спичкой, стеклянной или деревянной палочкой из разных мест доставленной порции, тщательно растирают на предметном стекле в капле 50% раствора глицерина или в физиологическом растворе, или в воде.

Накрывают покровным стеклом, слегка надавливая последнее (препаровальной иглой). Мазок должен быть тонким, прозрачным и равномерным. Он применяется лишь как дополнение к другим методам, дающим обогащение препарата. Просматривать следует не менее двух препаратов.

С целью обнаружения личинок гельминтов (а также яиц их) нативный мазок делается следующим образом (по Шульману): 2-3 г фекалий тщательно размешивают «закручиванием» стеклянной палочкой в эмульсию с пятикратным количеством чистой воды или физиологического раствора.

Во время размешивания личинки скопляются у стеклянной палочки, поэтому тотчас после окончания размешивания каплю эмульсии быстро переносят стеклянной палочкой на предметное стекло, накрывают покровным и исследуют. С. Д. Любченко (1936) доказала, что метод закручивания является более эффективным, чем метод мазка, особенно в отношении яиц аскарид.

На основании работы С. Д. Любченко мы считаем целесообразным заменить метод мазка методом закручивания.

Метод Фюллеборна

Метод Фюллеборна: 5-10 г фекалий, взятых из разных мест, помещают в баночку емкостью в 50-100 мл и тщательно растирают стеклянной или деревянной палочкой в насыщенном растворе поваренной соли (400 г этой соли растворяют в 1 л воды, нагревают до кипения и фильтруют через слой ваты или марли; раствор употребляется холодный: удельный вес 1,2).

Раствор приливают постепенно, пока не получится равномерная суспензия, причем общее количество приливаемого раствора должно быть приблизительно в 20 раз больше количества фекалий.

Для перемешивания фекалий Фюллеборн рекомендовал употреблять чайные стаканы, но удобнее готовить суспензию в баночках для мази емкостью в 50-100 мл, используя по две баночки на каждый анализ (или в стаканчиках емкостью в 100 мл).

Тотчас после приготовления суспензии с поверхности ее удаляют шпателем, металлическим совочком или кусочком чистой бумаги всплывшие на поверхность крупные частицы (растительные образования, непереваренные остатки пищи и пр), после чего смесь оставляют стоять на 1-1,5 часа.

По истечении этого времени с поверхности смеси снимают всю пленку прикосновением проволочной или платиновой петли (плашмя) диаметром не больше 1 см, согнутой под прямым углом; пленку стряхивают на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Под каждое покровное стекло (18х18 мм) помещают 3-4 капли.

Всего следует приготовить не менее 4 препаратов (на каждый препарат — одно покровное стекло). Петлю прокаливают на огне и промывают водой после каждого анализа.

https://www.youtube.com/watch?v=NIRCkWaysjE

По методу Фюллеборна быстро и легко обнаруживаются яйца всех нематод (за исключением неоплодотворенных яиц аскарид) и яйца карликового цепня.

Яйца трематод и крупных ленточных гельминтов всплывают плохо, поэтому в районах широкого распространения этих гельминтов рекомендуется дополнительно просматривать 2-4 препарата со дна смеси.

После снятия пленки с поверхности смесь выливают из посуды, оставляя на дне небольшой слой ее; 4-6 капель осадка переносят пипеткой или платиновой петлей на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и исследуют.

Для просветления к капле осадка прибавляют каплю глицерина.

Таблица. Сравнительные данные о форме и размере яиц гельминтов

Вид паразитаФорма, строение и размеры (в микронах) яицФото
Аскарида (Ascaris lumbricoides) оплодотворенное яйцоОвальная (реже шаровидная) форма, толстая, многослойная обо­лочка; наружная белковая оболочка крупнобугристая, окрашивающаяся в темножелтый цвет пиг­ментами испражнений. Внутри яйца мелкозернистый, шаровидный бластомэр, занимающий все яйцо за исключением полюсов. Размер: 50-70X40-50. Иногда яйца аскариды встречаются без белковой оболочки; они прозрачные, бесцветные или серозеленоватого оттенка и покрыты ровной, толстой оболочкой.
Аскарида (Ascaris lumbricoides) неоплодотворенное яйцоУдлиненная, вытянутая, иногда трехгранная, грушевидная, непра­вильная форма; белковая оболоч­ка — тонкая, мелкобугристая, упло­щенная на полюсах, желтоватого цвета. Все содержимое яйца запол­нено крупными полигональными желточными клетками (от полюса до полюса). Размер: 50-106X40-50.
Власоглав (Trichocephalus trichiurus, прежнее название — Trichocephalus dispar)Яйцевидная, бочонкообразная фор­ма; толстая, многослойная оболочка золотистожелтого или коричневого цвета (от пигмента испражнений). На полюсах имеются бесцветные, прозрачные, пробковидные образования; внутри яйца — мелкозернистое содержимое. Размер: 50-54X22-23.
Острица (Enterobius vermicularis, прежнее название Oxyuris vermicularis)Неправильная яйцевидная форма; тонкая, гладкая, бесцветная, многослойная оболочка; одна сторона уплощена, другая выпукла. Внутри яйца — зародыш на разной стадии развития, вплоть до личинки. Размер: 50-60X20-30.
Анкилостома (Ancylostoma duodenale и Necator americanus — диагностика этих двух видов по яйцам затруднительна)Правильная, овальная форма; тон­кая, прозрачная, бесцветная оболоч­ка. Внутри свежеотложенных яиц 4 бластомера, лежащих а центральной части яйца. Размер: 54-70X36-40.
Трихостронгилус (Trichostrongylus sp. — виды этого рода, встре­чающиеся у человека, по яйцам не диагносцируются)Овальная, яйцевидная форма; тонкая, прозрачная, бесцветная оболоч­ка с одним тупым закругленным и другим острым концом. Внутри свежевыделенных яиц 16-30 бластомеров. Размер: 73-80X40-43.
Бычий цепень (Taeniarhynchus saginatus, прежнее название Taenia saginata) и свиной цепень (Taenia solium)Шаровидная форма, яйцевая обо­лочка с 1-2 нитями. Внутри яйца онкосфера (зародыш) с толстой радиально исчерченной оболочкой, темнокоричневого цвета, с 6 эмбриональными крючочками внутри. Раз­меры онкосферы 31X40. Бычий и свиной цепень по строению яиц не различимы. В испражнениях чело­века встречаются не яйца, а онкосферы.
Карликовый цепень (Нуmenolepis nana, прежнее название — Tae­nia nana)Овальная форма; тонкая бесцвет­ная оболочка с лимоноподобной онкосферой внутри, от полюсов которой отходят длинные нитевидные придатки (филаменты); размер 40Х50. В онкосфере 6 зародышевых крючочков.
Лентец широкий (Diphyllobothrium latum, прежнее название Bothriocephalus latus)Яйцевидная форма; толстая, глад­кая оболочка серого или темнобурого цвета; внутри яйца крупнозернистое содержимое, на верхнем полюсе — крышечка, на противопо­ложном — бугорок (утолщение скор­лупы). Размер: 68-71X45.
Описторхис (Opisthorchis Felineus, прежнее название Distomum sibiricum)Яйцевидная форма; тонкая глад­кая оболочка бледножелтого цвета, с крышечкой на верхнем полюсе и с шипиком на противоположном полюсе. Нижняя половина яйца рас­ширена, внутреннее содержимое яйца мелкозернистое. Размер: 26-32X11-15.
Дикроцелиум — (Dicrocoelium lanceatum, прежнее название — Dicrocoelium lanceolatum)Яйцевидная форма; толстая глад­кая оболочка желтого или темнокоричневого цвета, с крышечкой на верхнем полюсе; одна сторона уплощена и слегка вогнута. Внутри яйца две крупные желточные клетки.Размер: 38-45X25-30.
Фасциола (Fasciola hepatica, прежнее название — Distomum hepaticum)Яйцевидная, правильная форма, тонкая гладкая оболочка желтого цвета, с крышечкой на верхнем по­люсе. Внутри яйца — многочисленные желточные клетки. Размер: 130-145X70-90.

Метод Бермана

Метод Бермана применяется для исследования испражнений на личинки гельминтов (при стронгилоидозе). Этот метод заключается в следующем: 5 г фекалий на металлической сетке (для этих целей удобна цедилка для молока) помещают на стеклянную воронку, прикрепленную к штативу. На нижний конец воронки надевают резиновую трубку с зажимом.

Сетку с калом приподнимают и в воронку наливают нагретую приблизительно до 50° воду таким образом, чтобы нижняя часть сетки с калом была погружена в воду. Личинки активно переходят в воду и скопляются в нижней части резиновой трубки. Через 2-4 часа открывают зажим и жидкость спускают в одну или две центрифужные пробирки.

После центрифугирования в течение 1-2 минут верхнюю часть жидкости быстро сливают, а осадок наносят каплями на предметные стекла и исследуют под покровными стеклами или распределяют тонким слоем на 2-3 больших стекла и тогда исследуют без покровных стекол.

Метод Бермана применяется также и для исследования почвы на наличие личинок анкилостом.

Метод Столла

Метод Столла применяется для определения интенсивности инвазии.

В специальную стеклянную колбочку наливают децинормальный раствор едкого натра до метки 56 см3, а затем прибавляют испражнения до тех на пор, пока уровень жидкости не достигнет 60 см3, т. е. 4 см3.

После взбалтывания со стеклянными бусами берут для исследования 0,075 мл смеси и исследуют под одним-двумя обычными покровными стеклами. Полученную сумму умножают на 200, чтобы получить количество яиц, содержащихся в 1 см3  испражнений.

Исследование дуоденального содержимого

Дуоденальный сок и пузырную желчь, полученные обычным путем при помощи зондирования (а пузырную желчь и после рефлекса с желчного пузыря), тщательно смешивают с равным объемом этилового эфира; смесь центрифугируют, после чего осадок исследуют под микроскопом. Помимо осадка, микроскопическому исследованию обязательно подвергаются плавающие в жидкости хлопья, в которых могут находиться яйца гельминтов. При исследование на яйца гельминтов желудочного сока и рвотных масс можно пользоваться этой же методикой.

Исследование дуоденального сока и содержимого желудка необходимо производить при подозрении на глистные заболевания печени, желчного пузыря (описторхоз, фасциолез, дикроцелиоз) и двенадцатиперстной кишки (стронгилоидоз).

Исследование мокроты

Мокроту растирают по стеклянной пластинке, плотно накрывают другой стеклянной пластинкой и рассматривают невооруженным глазом на светлом и черном фоне, а также под лупой при проходящем свете.

Отдельные кусочки мокроты («ржавые» скопления, обрывки тканей и пр.) наносят тонким слоем на предметное стекло, плотно накрывают его покровным и исследуют при малом и большом увеличении микроскопа.

Анализ мокроты следует производить при подозрении па эхинококкоз легких, парагонимоз и аскаридозную пневмонию. В мокроте могут быть обрывки оболочки эхинококковых пузырей с головками эхинококков, крючья эхинококков, личинки аскарид и яйца парагонимусов (трематод, паразитирующих в легких).

Исследование тканей на цистицеркоз и трихинеллез

а) Для диагносцирования цистицеркоза кожи, подкожной клетчатки или мышц, асептически вырезанный кусочек соответствующей ткани исследуют сначала не вооруженным глазом.

Участки тканей раздвигают при помощи препаровальных игл с целью обнаружения видимого простым глазом пузырька — цистицерка (фото А); длина его 6-20 мм, ширина 5-10 мм.

 При обнаружении пузырька, подозрительного на цистицерк, он раздавливается между двумя предметными стеклами и рассматривается под микроскопом. Цистицерк (Cistycercus cellulosae) определяется по наличию сколекса с четырьмя присосками и венчиком крючьев (фото Б).

Фото. А — цистицерки с вывернутыми наружу сколексами; Б — Головка свинного цепня.

б) Для диагносцирования трихинеллеза асептически вырезанный кусочек мышцы (двуглавой или икроножной) тщательно измельчают в 50% растворе глицерина на тончайшие волоконца с помощью препаровальных игл.

Измельченные мышцы сдавливаются между двумя предметными стеклами и исследуются при малом увеличении микроскопа в затемненном поле зрения. Исследование мышц на трихинеллез рекомендуется производить не ранее чем на 8-й день заболевания.

Личинки трихинелл находятся в мышцах в свернутом спиралью положении: они заключены в лимонообразные капсулы.

Фото. А —Личинки трихинелл в мышцах; Б — Обызвествленные капсулы трихинелл.

Рентгеноскопия

Наиболее часто рентгеноскопия применяется для диагносцирования эхинококкоза и реже — цистицеркоза. Цистицерки обнаруживаются при рентгеноскопии только после обызвествления (в случаях длительного заболевания). За последние годы рентгеноскопия применяется и для диагносцирования аскаридоза как в ранней личиночной стадии, так отчасти и в кишечной стадии.

В период миграции личинок аскарид (и анкилостомид) в легких выявляются нестойкие, иногда множественные воспалительные очаги; одновременно в крови появляется значительная эозинофилия.

Половозрелые аскариды хорошо видны при рентгеноскопии кишечника пораженных лиц.

Этот метод, несмотря на его сложность и громоздкость, должен быть использован как дополнительный для диагностики аскаридоза в случаях с отрицательным копрологическим анализом. По данным Е. С.

Геселевич, из 180 больных аскаридозом, выявленных при рентгеноскопии, у 54 в кале не было обнаружено яиц аскарид (смотри здесь).

Источник: http://diagnoster.ru/biblioteka/diagnostika-gelmintozov-vasilkova/

2.Микроскопическое исследование

ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой (но не стеклянной

Метод мазка.Деревяннойпалочкой или спичкой из разных местпорции берут 30-50мг фекалий и растираютна предметном стекле с несколькимикаплями 50% раствора глицерина. Мазокнакрывают покровным стеклом. Глицеринхорошо просветляет препарат.

Препарат изучаютпод малым увеличением микроскопа втемном поле зрения. Для выявлениядеталей строения яиц гельминтов микроскопируют при большом увеличении.

Метод обогащения.Метод обогащения позволяет концентрироватьи выявлять яйца гельминтов из относительнобольшого количества испражнений (до5,0г и более).

Он основан на разностиотносительной платности яиц гельминтови применяемого солевого раствора: еслиотносительная плотность яиц большеотносительной плотности жидкости, ониконцентрируются в осадке, в том случае,когда относительная плотность яицменьше относительной плотности жидкости,они всплывают (методы флотации). Применениеметодов флотации наиболее эффективнодля обнаружения яиц анкилостомы,некатора, власоглава, карликового цепня.

Фекалии разводятв насыщенном растворе хлорида натрия.Кал помещают в стаканчик с несколькимикаплями солевого раствора, тщательноразмешивают деревянной палочкой спостепенным добавлением жидкости до50 мл.

Смесь отстаивают 30-60 мин, а затемпроволочной петлей снимают образовавшуюсяна поверхности пленку и переносят еена предметное стекло. Исследуют не менее8 капель, снятых петлей. Каждые две каплинакрывают одним покровным стеклом.После анализа препаратов просматриваютосадок.

Для этого жидкость осторожносливают, из осадка берут не менее четырехкапель, которые исследуют под микроскопом.

Максимальноеколичество яиц анкилостом всплываетчерез 10 мин, капликового цепня – через15-20 мин, аскариды – через 1-2 часа,власоглава – 2-3 часа.

Методы осаждения.Примерно1,5 гр. кала перемешивают деревяннойпалочкой с 5 мл 50% раствора солянойкислоты в химическом стаканчике. Смесьпереливают в пробирку, добавляют 5 млэфира, закрывают пробкой и энергичновстряхивают несколько раз. Затемфильтруют в течение 1 мин черезметаллическую сетку.

При этом образуютсятри слоя: верхний, содержащий эфир срастворенными жирами и продуктами ихрасщепления; средний – соляная кислотас растворенными солями и нижний, вкотором остались непереваренные частицыпищи и яйца гельминтов. Верхние два слоясливают, добавляют воду и опятьцентрифугируют.

После этого 2-4 каплиосадка пипеткой переносят на предметноестекло, накрывают покровным имикроскопируют. Этот метод позволяетобнаружить яйца гельминтоз, трематод.

Биоптат слизистойоболочки толстой кишки и мочевогопузыря. Приотрицательных результатах исследованиякала или мочи изучают биоптаты слизистойоболочки толстой кишки (для диагностикикишечного шистосомоза) или мочевогопузыря.

При помощи щипцов, предназначенныхдля биопсии, с пораженной слизистойоболочки кишки или мочевого пузыряберут образцы величиной с рисовое зернои помещают на 5-10мин. в воду.

Два биоптатараздавливают между предметными стеклами,которые плотно сжимают, концы стеколзакрепляют липкой лентой и изучаютпрепарат под микроскопом.

Дуоденальноесодержимое и желчь. Вжелчи или дуоденальном содержимом могутбыть обнаружены яйца гельминтов,паразитирующих в печени, желчном пузыре,поджелудочной железе и двенадцатиперстнойкишке. Дуоденальное содержимое и желчьисследуют при подозрении на стронгилоидоз,фасциолез, описторхоз.

Дуоденальноесодержимое и желчь (порции А,В,С) получаютпри помощи тонкого зонда в ходезондирования. Каждую порцию отдельновыливают в чашки Петри, шпателем илипрепаровальной иглой извлекают слизистыеили другие комочки и из них готовятпрепараты для микроскопирования.

Оставшуюся жидкость из каждой чашкираздельно сливают в центрифужныепробирки, добавляют равное количествоэфира, взбалтывают и центрифугируют,надосадочную жидкость сливают, а весьосадок исследуют под микроскопом. Приотсутствии гноя и слизи эфир не добавляют.

Учитывать следует все яйца гельминтов,обнаруженные в осадке.

Моча. Собраннуюмочу (желательно суточное количество)отстаивают 1-2 часа в высоких банках. При высокой температуре воздуха к нейдобавляют консервант (мертиолят). Послеотстаивания верхнюю часть сливают,нижний слой центрифугируют и осадокисследуют под микроскопом. Если осадоксостоит из нескольких слоев, то исследуюткаждый слой отдельно.

Для концентрированиявозбудителей в моче используют методыосаждения или центрифугирования. Неменее 50 мл мочи, собранной в серединедня, помещают в конический стакан и даютотстояться в течение 30 мин. Верхнюючасть сливают, каплю из осадка мочипомещают на предметное стекло, готовятмазок и микроскопируют под малымувеличением.

Для подсчета яицшистосом порцию мочи энергично взбалтываюти 10 мл ее переносят в градуированнуюцентрифужную пробирку. Центрифугируютв течение 2 мин при 1000-1500об/мин. Удаляютнадосадочную жидкость, оставляя осадокне менее 0,2 мл. Осадок взбалтывают ипереносят 2-3 капли пипеткой на предметноестекло. Накрывают покровным и подсчитываютяйца шистосом в препарате.

Мокрота. Порциюмокроты просматривают визуально или слупой, выбирают комочки слизи, обрывкитканей и другие примеси, помещают напредметное стекло, накрывают покровнымстеклом и микроскопируют. Из остальнойпорции мокроты готовят мазки, которыепросматривают под микроскопом.

Чтобы облегчитьобнаружение яиц и личинок в гнойноймокроте, ее смешивают с равным количеством0,5%-го раствора гидроксида натрия иликалия. Слегка нагревают на водяной банеи центрифугируют. Из осадка готовятмазок и изучают его под микроскопом.

Кровь. Кровьисследуют на обнаружение микрофилярий.Берут ее из пальца или мочки уха ипомещают в центрифужную пробирку сантикоагулянтом. Кровь в пробиркецентрифугируют, сыворотку сливают,эритроциты гемолизируют, готовятпрепараты, окрашивают и микроскопируют.

Для получениянативного препарата крови на предметноестекло наносят вазелиновый квадратразмером с покровное стекло. В центрквадрата помещают небольшую каплю кровии слегка прижимают покровным стеклом.Исследуют под малым увеличением, прикотором видны микрофилярии, активнодвигающиеся между эритроцитов.

Для определениявида филярий используют окрашенныепрепараты – мазок и толстую каплю.Препараты окрашивают по Романовскому-Гимзе,исследуют при малом увеличении.

Если вмазке обнаружены микрофилярии, тоокрашивают дополнительно гематоксилиномв течение 15-60мин. и промывают 2 мин. впроточной воде. После этого препаратпомещают в 0,2% раствор соляной кислоты.

При этом чехлик микрофилярии окрашиваетсяв бледно-фиолетовый цвет, а ядерныесубстанции – в темно-фиолетовый.

Кожа. Вбиоптатах кожи или в материале, полученномпри ее скарификации, можно выявитьмикрофилярии онхоцерков и другихфилярий, а иногда – личинки шистосом игельминтов.

Материал дляисследования берут с учетом излюбленнойлокализации укусов членистоногих –переносчиков инвазии.

Энтомологическойбулавкой поднимают участок эпидермисаи лезвием безопасной бритвы срезаюткусочек тканей.

Его помещают на предметноестекло в каплю изотонического растворахлорида натрия и накрывают покровнымстеклом. Через 10 мин. препаратмикроскопируют. Личинки гельминтовобнаруживаются по краям препарата.

Соскоб из ногтевоголожа и смыв с рук.Край ногтевой пластинки и ногтевое ложеобрабатывают 0,5-1%-м раствором гидроксиданатрия м протирают ватным тампоном,смоченным тем же раствором. Тампонпомещают в центрифужную пробирку сраствором гидроксида натрия, взбалтывают,центрифугируют 3-6 мин при 1500об/мин и изосадка готовят мазок для микроскопии.

В соскобе с ногтевоголожа чаще всего обнаруживают яйцаостриц, но возможно выявление яиц идругих гельминтов.

22

Источник: https://studfile.net/preview/2487530/page:5/

Диагностика протозойных инфекций: классификация простейших, исследуемые материалы, разные методы диагностики, расшифровка результатов анализов

ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой (но не стеклянной

Не все простейшие (Protozoa), паразитирующие у человека, являются возбудителями заболеваний. Для обнаружения вида возбудителя и подтверждения клинического диагноза не обойтись без методов лабораторной диагностики. Простейшие, поселившиеся в организме человека, могут находиться в разных стадиях своего развития.

Классы паразитов и исследуемые биоматериалы Частные виды диагностики – Диагностика корненожек (амёб) – Диагностика ресничных (инфузорий) – Диагностика жгутиконосцев (лейшманий, лямблий, трипаносом, трихомонад) – Выявление споровиков (малярийного плазмодия, возбудителя кокцидоза и пр.) 3. Основные методы исследования простейших – Диагностика простейших методом нативного мазка и мазка, окрашенного раствором Люголя (в кале) – Метод консервации (исследование кала) при диагностике простейших – Метод формалин-эфирного обогащения (анализ на наличие простейших в кале) – Метод нахождения лейшманий (мазок костного мозга) – Метод обнаружения лейшманий в мазке из кожного инфильтрата – Метод выделения чистой культуры лейшманий, полученных путем соскоба патологических тканей

Классы паразитов и исследуемые биоматериалы

Подразделяются простейшие на 4 класса:

  • корненожки (Rhizopoda) – представлены у человека амёбами;
  • жгутиконосцы (flagellata) – основной патологический представитель – лейшмании;
  • ресничные (ciliata) инфузории – самый распространенный возбудитель болезни – балантидий;
  • споровики (sporozoa) – опасный паразит этой группы – малярийный плазмодий.

При инцистировании микроорганизм приобретает округлую форму и покрывается защитной оболочкой. В форме цисты простейшие становятся маловосприимчивыми к неблагоприятным факторам среды.

Локализация патогенных микроорганизмов может быть в разных органах и тканевых структурах. Поэтому выбор материала для исследования зависит от того, где может находиться паразит.

Исследованию могут подвергаться:

  • кровь;
  • костный мозг;
  • содержимое абсцессов (в печени, легких, мозге);
  • содержимое полостей (брюшной, плевральной, перикардиальной);
  • мокрота;
  • моча;
  • кал;
  • слизь и экссудаты кишечника, свищей.

Обратите внимание: разновидностей диагностики очень много, мы рассмотрим те виды, которые наиболее распространены в клинической лабораторной практике.

Частные виды диагностики

В каждом конкретном случае перед лаборантом ставится задача нахождения определенного возбудителя, иногда попутно с основным обнаруживаются и другие.

Диагностика корненожек (амёб)

Насчитывается 6 видов этого микроорганизма, способного к обитанию в кишечнике человека. Клиническое значение имеет только дизентерийная амёба, встречающаяся в вегетативной форме и в виде цист.

Основной путь обнаружения паразита – исследование в нативном (необработанном) биологическом препарате.

Дополнительно применяются иммунологические методы:

  • непрямой иммунофлюоресценции;
  • непрямой агглютинации (РНА);
  • радиальной иммунодиффузии.

Обратите внимание: серологические методы малоинформативны и применяются лишь как дополнение к основным в сомнительных случаях.

Диагностика ресничных (инфузорий)

Патогенная форма микроорганизмов этого рода – балантидий. Это микроб, вызывающий балантидиаз – болезнь, сопровождающуюся язвенным процессом толстого кишечника. Возбудитель обнаруживается в нативном мазке в виде вегетативной формы и цисты. Материал для мазка (кал и слизь) забирается при ректороманоскопическом исследовании и высевается на специальные среды.

Рекомендуем прочитать: Балантидиаз: симптомы, лечение и профилактика

Диагностика жгутиконосцев (лейшманий, лямблий, трипаносом, трихомонад)

Для человека представляют опасность лейшмании, трипаносомы, лямблии, трихомонады.

Лейшмании – микробы, вызывающие лейшманиоз, исследуются в мазках крови, материалах костного мозга, соскобов из кожных инфильтратов. В некоторых случаях при диагностике лейшманий применяется посев на питательные среды.

Рекомендуем прочитать: Лейшманиозы: причины, симптомы, диагностика, лечение и профилактика

Трипаносомы – возбудители сонной болезни (американский/африканский трипаносомоз, или болезнь Шагаса).

Африканский вариант определяют в начальном периоде при исследовании периферической крови.  Патологические микробы при прогрессировании болезни находятся в материале пункций лимфоузлов, в запущенных стадиях – в спинномозговой жидкости.

Возбудителя Американского трипаносомоза в острую фазу болезни можно найти в жгутиковой форме. В дальнейшем безжгутиковые паразиты находятся в мышечных клетках, миокарде, в нейронах центральной нервной системы.

Для диагностики трипаносом при подозрении на болезнь Шагаса исследуемый материал обследуется под микроскопом при малом увеличении. При этом мазки и толстую каплю предварительно окрашивают.

Лямблии, ведущие паразитический образ жизни в двенадцатиперстной кишке находят в желчи или в анализе кала (цисты).

Рекомендуем прочитать:  Лямблиоз: симптомы, лечение и диагностика

Трихомонады (кишечная, ротовая, влагалищная) обнаруживаются при микроскопии материалов, взятых из пораженных слизистых оболочек.

Выявление споровиков (малярийного плазмодия, возбудителя кокцидоза и пр.)

Споровики – паразитические формы, обитающие в клетках, тканях и полостях организма.

Наиболее распространенный и опасный для человека вид – малярийный плазмодий, имеющий 4 основные разновидности возбудителя: возбудитель трехдневной малярии, четырехдневной малярии, тропической малярии и малярии овале.

Рекомендуем прочитать:  Малярия: причины, симптомы, диагностика, лечение и профилактика

Половое развитие плазмодия (спорогония) проходит в комарах Анофелес. Бесполое (тканевая и эритроцитарная шизогония) – в печеночной ткани и эритроцитах человека. Эти особенности жизненного цикла обязательно учитываются при диагностике малярийного плазмодия.

Так, у только что заболевшего больного в крови можно обнаружить половые клетки цикла спорогонии. А вот на высоте малярийных приступов в крови в большом количестве появляются шизонты. 

Более того, в разные фазы малярийной лихорадки проявляются различные формы плазмодия:

  • в период озноба кровь наполняется мерозоитами, разновидностью шизонтов;
  • на высоте температуры в эритроцитах скапливаются кольцевидные трофозоиты;
  • снижение температуры характеризуется преобладанием амебовидных трофозоитов;
  • в периоды нормального состояния кровь содержит взрослые формы шизонтов.

Исследование возбудителя малярии (малярийного плазмодия) проводится в мазке и в толстой капле.

Морфологические формы паразитов для четкой дифференциации анализируются путем специфического окрашивания. Этот вариант «визуализации» позволяет разобрать индивидуальные морфологические особенности той или иной разновидности микроорганизма.

Обратите внимание: диагностика малярии при исследовании мазков и толстых капель крови иногда бывает ошибочной. Тромбоциты крови в некоторых случаях могут ошибочно быть причислены к малярийному возбудителю. Также иногда симулируют плазмодий фрагменты лейкоцитов и других клеток.

Основные методы исследования простейших

Кратко ознакомимся с самыми распространенными методами исследования на наличие простейших.

Диагностика простейших методом нативного мазка и мазка, окрашенного раствором Люголя (в кале)

Препарат готовится из эмульсии кала в изотоническом растворе. На предметное стекло наносятся две капли натрия хлора и рядом раствор Люголя. В оба состава деревянной палочкой добавляют исследуемый материал и после накрывания стеклом просматривают в разных разрешениях микроскопа.

По определенным признакам регистрируют найденных простейших. Для точности готовят 2-3 препарата из одного материала. В сомнительных случаях анализ повторяют несколько раз на протяжении 2-3-х недель.

Методом можно обнаружить вегетативные и цистные формы:

  • лямблий;
  • балантидий;
  • дизентерийной амебы.

Вместе с патогенными формами определяются и непатогенные простейшие. Также у здоровых носителей находятся просветные и цистные формы.

Важно: исследования во избежание неточностей и ошибок следует проводить неоднократно.

Результат диагностики простейших методом нативного и окрашенного мазка должен содержать описание формы возбудителя (просветная, циста, тканевая).

Требования к исследованию:

  • забранный на анализ материал (жидкий кал) исследуется не позднее 30 минут после дефекации;
  • оформленный кал необходимо подвергнуть диагностике в течение 2 часов после дефекации;
  • в материале не должно быть примесей (дезинфицирующих средств, воды, мочи);
  • для работы с материалом используют только деревянные палочки, стеклянные не пригодны из-за соскальзывания слизи;
  • палочки после использования немедленно необходимо сжигать.

Метод консервации (исследование кала) при диагностике простейших

Исследование проводится путем фиксации простейших с консервантом. Отличие этого метода от предыдущего в том, что консерванты позволяют сохранить препарат в течение длительного периода.

Используемые консерванты:

  • Барроу. Содержит консервирующие ингредиенты: 0,7 мл хлорида натрия, 5 мл формалина, 12,5 мл 96% спирта, 2 г фенола и 100 мл дистиллированной воды. Красящий состав: 0,01% раствор тионина (азура).
  • Раствор Сафарлиева. Состав: 1,65 г сульфата цинка, 10 мл формалина, 2,5 г кристаллического фенола, 5 мл уксусной кислоты, 0,2 г метиленового синего, 100 мл воды. Этот консервант используется в случаях, когда материал должен храниться более месяца.

Консервантом наполняются пустые флаконы, в них переносят материал, в пропорциях 3:1, затем при необходимости добавляют краситель. Оценка результатов производится при исследовании 2-3-х препаратов.

Метод формалин-эфирного обогащения (анализ на наличие простейших в кале)

Этот способ диагностики позволяет отделить и сконцентрировать цисты простейших. Для анализа нужны следующие ингредиенты: формалин (10 мл), 0,85 г изотонического раствора, дистиллированная вода, серный эфир, раствор Люголя.

Смесь биоматериала с перечисленными жидкостями смешивают и центрифугируют. Полученный на дне пробирки осадок окрашивают раствором Люголя и исследуют на предмет наличия цист и вегетативных форм.

Метод нахождения лейшманий (мазок костного мозга)

Для диагностики лейшманиоза используются реактивы: смесь Никифорова (серный эфир и этиловый спирт), фосфатный буфер, Азур-эозин по Романовскому.

Вещество костного мозга очень осторожно помещают на предметное стекло после специальной подготовки. Используется микроскоп с иммерсионной системой.

В острый период болезни в пунктате обнаруживается большое количество лейшманий.

Обратите внимание: иногда кровяные клетки могут напоминать обработанные лейшмании, поэтому очень важно лаборанту быть внимательным и иметь достаточный опыт для самостоятельного исследования.

Метод обнаружения лейшманий в мазке из кожного инфильтрата

Необходимые реактивы аналогичны предыдущему анализу.

Исследуемый материал получают из имеющегося бугорка или язвенного содержимого. Соскоб при подозрении на лейшманиоз делается очень аккуратно скальпелем, без крови. Затем готовится препарат на стекле. Для точности получаемых результатов одновременно подвергают осмотру несколько препаратов.

При наличии заболевания среди присутствующих в исследуемом материале макрофагов, фибробластов, лимфоидных клеток определяются и лейшмании.

Метод выделения чистой культуры лейшманий, полученных путем соскоба патологических тканей

При этом способе диагностики простейших соскоб тканей помещают в специальную питательную среду, в которой происходит активное размножение лейшманий.

Перед забором соскоба кожу тщательно обрабатывают спиртом, затем делается надрез бугорка, со дна которого извлекается содержимое и помещается в пробирку со средой.

Материал забирается несколько раз, после чего он помещается в разные пробирки. Затем в термостате при температуре 22-24 градуса происходит культивирование. Результаты оценивают под микроскопом.

Этот метод применяется, когда другие, более дешевые и быстрые способы диагностики простейших неэффективны.

Увидеть, как на практике расшифровываются анализы на наличие простейших по капле крови, вы сможете, посмотрев видео-обзор: 

Лотин Александр, медицинский обозреватель

10,754  5 

(53 голос., 4,30 из 5)
Загрузка…

Источник: https://okeydoc.ru/diagnostika-protozojnyx-infekcij/

Исследование кала метод нативного мазка

ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой (но не стеклянной

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

  1. Предметные стекла.
  2. Покровные стекла.
  3. Стеклянные палочки длиной 15-20 см с оплавленными концами.
  4. Чашки Петри.
  5. Йодистый калий.
  6. Йод.
  7. Нейтральрот.
  8. Бриллиантгрюн.
  9. Судан III.
  10. Этиловый спирт 96°.
  11. Дистиллированная вода.
  12. Дезинфицирующие растворы.

Препараты для микроскопии готовят из растертого с водой кала и из видимых примесей (если они имеются) . Стеклянную палочку с оплавленным концом вносят в растертый кал. Взятую каплю материала помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и слегка придавливают его сверху.

Из видимых примесей готовят второй препарат с помощью шпателя и иглы. Слизь, кровь, остатки пищи и другие образования помещают на предметное стекло рядом с первым препаратом, приготовленным из растертого кала, и накрывают покровным стеклом (слизистые клочки предварительно промывают водопроводной водой).

Для лучшего распознавания и выявления микроскопических элементов кала окрашивают три препарата: первый — реактивом Люголя, второй — смесью нейтральрот + бриллиантгрюн, третий — Суданом III.

Реактивы для окраски препаратов готовят следующим образом:

  1. Реактив Люголя: к 2 г йодистого калия, помещенного в колбочку емкостью 50 мл, приливают около 1 мл дистиллированной воды, прибавляют 1 г кристаллического йода и дистиллированной воды до метки 50 мл.
  2. Раствор краски судан III: растворяют 2 г краски судан III в 10 мл 96° спирта и приливают 90 мл 80° спирта или ледяной уксусной кислоты до получения ярко-красного окрашивания.
  3. 1% водный раствор нейтральрота: в колбочку на 100 мл помещают 1 г краски нейтральрот и доливают дистиллированной водой до метки 100 мл.
  4. 2% водный раствор бриллиантгрюна: 2 г краски бриллиантгрюн помещают в колбочку на 100 мл и доливают дистиллированной водой до метки 100 мл.

Техника окраски препаратов . К препарату прибавляют 1-2 капли соответствующего реактива, затем вновь накрывают его покровным стеклом и изучают под микроскопом. Техника изучения препаратов кала под микроскопом такая же, как и препаратов мочи.

Элементы, обнаруживаемые при микроскопическом исследовании препаратов кала, подразделяют на три группы: а) элементы пищи (животного и растительного происхождения), б) элементы кишечной стенки и в) кристаллические образования.

К первой группе относятся:
а) Мышечные волокна (рис. 19).

Имеют (в нормальном кале) вид неправильных четырехугольников или округлых образований желтой окраски (цвет охры), в центре окрашены более интенсивно, чем по краям, при окраске раствором Люголя принимают цвет красного дерева.

Непереваренные или недостаточно переваренные мышечные волокна имеют ясно выраженные углы, а также поперечную и продольную исчерченность, подобпые волокна можно видеть изолированно и в виде групп, соединенных между собой.

б) Соединительная ткань (рис. 20). Имеет вид перекрещивающихся тонких волоконец, встречающихся изолированно или в сочетании с группами мышечных волокон.

Рис. 20. Соединительная ткань в виде густых скоплений эластических волокон.

в) Жир нейтральный (рис. 21, 1) имеет вид бесцветных или слегка желтоватых капель разной величины или крупных лужиц. Будучи окрашены Суданом III, становятся красными, оранжевыми или желтыми.

Рис. 21. Жиры (1), жирные кислоты (2), мыла (3, 4) в испражнениях.

г) Жирные кислоты (рис. 21, 2). Представляют собой кристаллы, имеющие вид иголок, лежащих поодиночке или собранных в пучки. При окраске Суданом III не окрашиваются (капли и глыбки окрашиваются так же, как и жиры), смесью 1% раствора нейтральрота и 2% раствора бриллиантгрюна окрашиваются в красный цвет.

д) Мыла (рис. 21, 3-4) — кальциевые и магниевые соли жирных кислот. Встречаются в виде глыбок или игольчатых кристаллов, более коротких, чем жирные кислоты, и чаще сгруппированных в пучки. Мыла Суданом III не окрашиваются, а смесыо 1% раствора нейтральрота и 2% раствора бриллиантгрюна окрашиваются в зеленый цвет.

е) Крахмал (рис. 22, 3). Крахмальные зерна округлой или овальной формы, лежат изолированно, каждое зерно сильно преломляет свет.

В зависимости от степени переваривания зерен концентрическая исчерченность может быть выражена по-разному. Встречают крахмальные зерна и внутри крахмалистой клетки (картофель, бобы).

Раствором Люголя неизмененные крахмалыные зерна окрашиваются в синий цвет, а измененные — в лилово-красноватый.

ж) Дрожжевые грибки . Это образования овальной формы, снабженные почковидными отростками. Раствором Люголя окрашиваются в желтовато-красный цвет.

з) Растительная клетчатка (рис. 22). Перевариваемая клетчатка — крупные прозрачные, как правило, неокрашенные образования неправильной формы, имеющие ячеистое строение (картофель, фасоль, каштан и др.).

Неперевариваемая клетчатка (оболочка хлебных зерен, растительные сосуды, волоски, пласты эпидермы и пр.

) имеет широкие, утолщенные межклеточные пространства, двуконтурные клетки, непрозрачна, окрашена в коричневый или желтый цвет.

Вторую группу составляют:
а) Слизь — прозрачная гомогенная масса. Как правило, встречается с лейкоцитами, эритроцитами и эпителием. Слизь из верхних отделов кишечника смешана с каловыми массами.

б) Лейкоциты . Могут быть неизмененными, но чаще подвергаются распаду и изменяются. Лучше различать их в окрашенных (раствором Люголя, Суданом III и пр.) препаратах. Эозинофилы содержат однородную, сильно преломляющую свет зернистость. Среди эозинофилов иногда обнаруживают кристаллы Шарко-Лейдена.

в) Эритроциты . Могут быть неизмененными и выщелоченными. Кровь может выделяться с калом и в виде аморфного распада, окрашенного в буроватый цвет.

г) Эпителий . Клетки различной формы и величины: 1) плоский эпителий (выстилающий заднепроходное отверстие) — полигональной формы, с маленьким ядром; 2) эпителий, выстилающий слизистую оболочку кишечника, — цилиндрической формы с четко контурированным ядром.

Иногда они могут быть измененной формы и различной величины с жировым перерождением и вакуолизацией. При злокачественном перерождении имеют вид полиморфных клеток с большим пузырьковидным ядром и с грубозернистой, вакуолизированной протоплазмой, располагающихся отдельно и группами.

В третью группу входят кристаллические образования:
а) Кристаллы трипельфосфата .
б) Кристаллы оксалатов .
в) Билирубин .
г) Гематоидин .

Подробное описание указанных элементов дано в теме «Микроскопическое исследование мочи».

д) Кристаллы закиси висмута (рис. 23, 2) — темно-бурые, прямоугольные или ромбические образования. Обнаруживаются после приема солей висмута.

е) Соли бария (рис. 23, 1) — однородные мелкие бесцветные глыбки. Встречаются в течение нескольких дней после проведения рентгенологического исследования желудка.

ж) Частицы угля (рис. 23, 3). Окрашены в черный цвет, по форме напоминают кристаллы висмута.

Pиc. 23. Соли бария (1), висмута (2), уголь (3).

источник

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Анализ кала на глисты правильно называется анализом на яйца глист, поскольку в ходе выполнения манипуляции сотрудник диагностической лаборатории исследует фекалии на предмет наличия яиц различных паразитических червей, которые могут поражать органы и ткани человеческого организма. А поскольку собирательное название всех паразитических червей – это глисты, то основной целью анализа является обнаружение или подтверждение отсутствия яиц данных паразитов.

Дело в том, что в различных органах и тканях человеческого тела может паразитировать около 250 видов червей (глистов), которые размножаются, откладывая яйца. Именно эти яйца попадают в кишечник и выделяются наружу вместе с фекалиями.

Изучение мазка каловых масс под микроскопом позволяет увидеть глазом личинки и яйца различных паразитических червей, тем самым, диагностировав их наличие.

То есть, анализ кала на яйца глист представляет собой метод диагностики гельминтозов – заболеваний, вызываемых паразитическими червями (глистами).

Анализ кала на яйца глист сдается в двух возможных случаях:
1. Подозрение на заражение гельминтами (гельминтоз);
2. Барьерный анализ.

Барьерный анализ представляет собой обязательное исследование, включенное в рутинную процедуру обследования людей, поступающих на работу, связанную с продажей, обработкой или хранением продуктов питания, контактами с людьми и прочими сферами деятельности, в которых возможна передача гельминтов окружающим. В данной ситуации анализ кала на яйца глист является скрининговым, то есть, используемым для массовой и быстрой диагностики гельминтозов у многих людей. Коротко можно сказать, что в качестве обязательного барьерного анализа кал на яйца глист сдается для оформления санитарной книжки и при поступлении в детский сад, школу, бассейн или перед плановой госпитализацией в стационар. Данный анализ необходимо сдать, поскольку человек будет контактировать с окружающими, а если он инфицирован гельминтозом, то может заразить других, тем самым, распространив заболевание.

Вторым показанием для сдачи анализа кала на яйца глист является подозрение на заражение какими-либо гельминтами.

Подозрение на гельминтоз (заражение паразитическими червями) возникает при наличии у человека различных вариабельных симптомов нарушения работы различных органов при отсутствии соответствующего заболевания.

Дело в том, что паразитические черви (гельминты) могут поражать различные органы и ткани, например, кишечник, мочевой пузырь, уретру, головной мозг, печень, сердце, лимфатические узлы и другие, вызывая симптоматику различных заболеваний.

Если в ходе обследования не обнаруживается заболевания органа, со стороны которого имеются патологические симптомы, то возникает закономерное подозрение на гельминтоз, которое требует подтверждения или опровержения. Именно с целью подтверждения или опровержения гельминтоза сдается анализ кала на яйца глист в такой ситуации.

Анализ кала на яйца глист показан к сдаче при наличии у человека следующих симптомов:

  • Воспалительные заболевания органов желудочно-кишечного тракта (например, боль в желудке, поносы, запоры, метеоризм и т.д.);
  • Утомляемость;
  • Раздражительность;
  • Тревожный сон;
  • Бруксизм (скрип зубами);
  • Зуд в области анального отверстия;
  • Вульвовагинит у женщин;
  • Инфекции мочевыводящих путей;
  • Отставание в росте и массе тела у растущих детей и подростков;
  • Повышенное количество эозинофилов в крови;
  • Аллергический синдром неясной природы, при котором не удается выявить аллерген, вызывающий патологическую реакцию со стороны организма;
  • Частый простудные заболевания и вирусные инфекции.

При наличии каких-либо указанных симптомов необходимо сдать анализ кала на яйца глист, поскольку они являются достаточными факторами для подозрения на гельминтоз.

Однако только анализа кала может быть недостаточно для диагностики гельминтоза, и при подозрении на паразитоз придется сдавать пробы желчи, мокроты, дуоденального содержимого и других биологических секретов организма человека, в которых могут оказаться яйца или личинки паразитарных червей.

Перед сдачей кала на яйца глист следует в течение недели не принимать касторовое или минеральное масло, антибиотики, противодиарейные и противопаразитарные средства, а также препараты висмута и магния. Также в течение 7 – 14 дней перед сдачей кала на яйца глист не рекомендуется производить ирригоскопию.

Кроме того, необходимо психологически и морально настроиться на то, что для качественной диагностики гельминтозов понадобится на одна, а три или шесть проб кала, которые необходимо будет сдавать ежедневно или через 1 – 2 дня. Обычно необходимо три пробы кала, но если имеется подозрение на дизентерийную амебу или лямблии, то оптимально сдать шесть проб фекалий.

Рекомендуется заранее подготовить посуду для пробы кала. В настоящее время уже не используются привычные многим людям с детских лет спичечные коробки, поскольку лаборатории выдают специальные пластиковые контейнеры с закручивающейся крышкой.

Если в лаборатории контейнер не выдали, то его можно купить в обычной аптеке.

Лучше использовать именно такой одноразовый контейнер, а не какую-либо имеющуюся дома посуду или коробку, поскольку в них могут оказаться личинки или яйца паразитов, занесенные случайно грязными руками, которые при исследовании будут выявлены и, таким образом, человек получит ложноположительный результат.

Более никакой специальной подготовки к сдаче анализа кала на яйца глист производить не нужно.

Перед дефекацией необходимо помочиться, чтобы моча не попала на каловые массы. Затем необходимо, не подмывая кожу анального отверстия, покакать в какую-либо емкость, откуда удобно будет набирать пробы кала (например, горшок, таз и т.д.).

Из всей массы кала необходимо собрать небольшой объем, соответствующий примерно двух чайным ложкам, забирая пробы с разных частей фекалий специальной палочкой, припаянной к крышке стерильного контейнера. Если контейнера для кала нет, то можно собирать пробы обычной спичкой или палочкой.

Оптимально взять 3 – 4 небольших кусочка с боков, передней и задней частей верхней поверхности, а также изнутри фекальных масс. Все забранные части кала помещают в контейнер и плотно закрывают крышку.

К контейнеру приклеивают бумажку с фамилией, именем и отчеством и быстро транспортируют в лабораторию.

Для наиболее точных результатов оптимально сдать пробы кала на яйца глист в лабораторию в течение 30 – 45 минут после дефекации и их забора.

Однако если в течение такого короткого срока сдать пробу кала в лабораторию невозможно, то это можно сделать в течение максимум 5 – 8 часов, обязательно сохраняя фекалии в холодильнике при температуре +4 +8 o С.

Если пробы кала дольше 60 минут пролежали не в холодильнике, а в теплом помещении, то они не пригодны для сдачи на яйца глист. В таком случае придется выбросить испорченную пробу и собрать новую после следующей дефекации.

Для точной и исчерпывающей диагностики необходимо сдать всего три пробы кала. Причем собирать пробы можно ежедневно или через 1 – 2 дня. Итоговый результат исследования можно получить только после исследования трех проб.

В норме результат анализа кала на яйца глист во всех трех пробах должен быть отрицательным. Это означает, что яйца гельминтов не обнаружены, и человек не заражен паразитическими червями.

Положительный результат хотя бы в одной из проб кала является показателем того, что у человека обнаружены гельминты, и, следовательно, он заражен паразитическими червями. В такой ситуации потребуется пройти курс лечения и через месяц после его окончания сдать повторный анализ кала.

Если результат анализа кала на яйца глист положительный, то в нем указано, какой именно вид паразитических гельминтов был обнаружен.

Примерная формулировка положительного анализа кала на яйца глист следующая: «Положительно, яйца аскарид».

В каждой лаборатории формулировка может незначительно варьироваться, но в ней обязательно будет присутствовать термин «положительно», означающий наличие паразитических червей, и название вида гельминтов, яйца которых были обнаружены.

Выявление паразитарных червей в пробах кала в лаборатории осуществляют при помощи методов копроовоскопии (гельминтоовоскопии), то есть обнаружения яиц гельминтов. В лабораториях для диагностики паразитов у человека обычно используют три основных метода копроовоскопии:
1. Микроскопия нативного мазка;
2. Метод Фюллеборна;
3. Метод Талемана.

Обычно пробу кала последовательно подвергают всем трем методам копроовоскопии. Причем в первую очередь производят микроскопию нативного мазка, а затем в произвольном порядке делают пробу Фюллеборна и Талемана.

Проба Фюллеборна заключается в смешивании фекалий с соленой водой, которая имеет высокую плотность и удельный вес, за счет чего яйца гельминтов всплывают на ее поверхность. Для проведения пробы 10 г кала размешивают со 100 мл 50% раствора поваренной соли. Раствор готовят следующим образом – 450 – 500 г соли растворяют в 1 литре воды, нагрев ее до температуры 50 – 70 o С.

Источник: https://nstone51.ru/kal/issledovanie-kala-metod-nativnogo-mazka/

Гельминтоовоскопические методы диагностики

ПРОСТЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ: Метод мазка. Деревянной палочкой или спичкой (но не стеклянной

⇐ ПредыдущаяСтр 23 из 342Следующая ⇒

Гельминтоовоскопия включает в себя многие методы исследова­ний, используемые для обнаружения яиц гельминтов. Однако не все методы по своей эффективности равнозначны.

Известно, что интенсивность выделения яиц гельминтами зависит от многих фак­торов.

В частности, у овцематок весной в период лактации резко повышается выделение яиц кишечных нематод, осенью же с насту­плением холодов у диктиокаулюсов наступает половая депрессия.

Фекалии для исследования желательно брать из прямой кишки животного. Если в данный момент в конечном отрезке прямой кишки фекалии отсутствуют, то делают легкий массаж слизистой ануса.

Для диагностики трематодозов, аскаридатозов, трихоцефалезов, анаплоцефалятозов пробы можно брать с пола, но при кишеч­ных и легочных нематодозах фекалии нужно брать только из пря­мой кишки. Кроме того, при кишечных и легочных нематодозах исследования следует проводить в день взятия проб.

Если же нет возможности исследовать своевременно, то пробы помещают в холодильник при температуре 3—4 °С (на 12—14 ч).

Для длительного хранения фекалии консервируют химическими консервантами. С этой целью используют моющее средство «Ло­тос» (5 частей 1%-ного раствора на 1 часть фекалий) или «Экстра» (15 частей 1,5%-ного раствора на 3 части фекалий).

Хранение в ука­занных растворах допускается до 12 сут. Эти растворы — хорошие консервирующие средства для яиц аскарид, трихоцефалюсов, анкилостоматид, трихостронгилил, тениид, описторхисов, дикроцели-умов и шистосом.

Можно использовать и жидкость Барбагалло (3%-ный раствор формалина на физрастворе).

Для длительного хра­нения яиц гельминтов (6—8 мес) применяют смесь 0,2%-ного вод­ного раствора нитрата натрия (1900 мл), раствора Люголя (6 г йода, 10 г йодида калия, 250 мл воды), формалина (300 мл) и глицерина (25 мл). Существует много методов гельминтоовоскопии.

Метод нативного мазка.Он наиболее прост и легок, но наименее эффективен.

Для исследования берут небольшой (с горошину) кусо­чек фекалий, помещают на предметное стекло, разбавляют 2—3 каплями воды или смеси глицерина с водой (1:1). Затем грубые частицы удаляют, а осадок исследуют под микроскопом.

Жела­тельно от одного животного одновременно исследовать 2—3 пробы фекалий. Более успешно метод применяют при кишечных цестодозах и нематодозах.

Метод соскоба с перианальных складок.Применяют для диагно­стики оксиуроза лошадей и пассалуроза кроликов.

Из деревянной палочки или щепочки делают лопаточки (можно и спички), смачи­вают смесью глицерина с водой (1:1) и делают соскоб с перианаль­ных складок с внутренней стороны хвоста в области промежности.

Соскоб переносят на предметное стекло с указанной смесью, накры­вают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. У кроли­ков при пассалурозе можно дополнительно исследовать смыв с перианалъных складок.

Метод последовательных смывов.Им можно пользоваться для диагностики многих гельминтозов, но в основном применяют для диагностики трематодозов. На результаты исследований суще­ственно влияют масса пробы и ее состав. Для исследования доста­точно брать 3—5 г фекалий.

Их смешивают в фарфоровой ступке при помощи пестика с 10-кратным количеством воды и фильтруют через металлическое сито (ячейки диаметром не более 0,19 мм) или марлю в один слой. Пробы отстаивают в среднем 10 мин. Это зави­сит от состава проб. Например, фекалии крупного рогатого скота в пастбищный период плохо промываются и недостаточно просветля­ются. Поэтому их нужно отстаивать 12—13 мин.

После отстаивания верхний слой жидкости осторожно сливают до появления сплошной грязной полоски, а к осадку добавляют свежую порцию воды и снова дают отстояться 6—8 мин. Процедуру повторяют до тех пор, пока верхний слой жидкости не станет светлее. Жидкость сливают, а осадок (около 5 мл) исследуют под микроскопом.

Если фекалии мелкого рогатого скота уже сформировались в катышки или подсохли, то их следует растереть в ступке с небольшим количе­ством воды и после этого добавить требуемый объем воды

Метод флотации и его модификации.Этот метод основан на прин­ципе разницы удельных масс яиц и используемых солевых растворов. Для вылавливания всплывших яиц используют петлю из мягкой про­волоки с диаметром кольца 8—10 мм.

При меньшем диаметре затруд­няется сбрасывание капли на предметное стекло, при большем — пленка в кольце разрывается. Целесообразно брать с поверхности взвеси от 3 до 6 капель в зависимости от величины покровного сте­кла.

Если же поставлена цель лишь обнаружить яйца, то можно исследовать верхний слой капель (без покровного стекла).

Для флотации яиц предложено большое количество насыщен­ных растворов солей — хлорид натрия (поваренная соль) плотно­стью 1,18—1,20 кг/м3 (400 г на 1 л воды), нитрат аммония (грану­лированная или химически чистая аммиачная селитра) плотностью 1,3 кг/м3 (1500 г на 1 л воды), нитрат свинца (азотнокислый свинец) плотностью 1,5 кг/м3 (650 г на 1 л воды), нитрат натрия (натриевая селитра) плотностью 1,38—1,4 кг/м3 (1000 г на 1 л воды), тиосульфат натрия плотностью 1,4 кг/м3 (1750 г на 1 л воды), хлорид цинка плот­ностью 1,82 кг/м3 (2000 г на 1 л горячей воды), сульфат магния (анг­лийская соль) плотностью 1,26—1,28 кг/м3 (920 г на 1 л воды).

Методами флотации пользуются в основном при диагностике цестодозов и нематодозов. Однако при наличии растворов солей с высокой удельной массой можно диагностировать и трематодозы.

Метод Фюллеборна.Для его осуществления нужен насыщенный раствор поваренной соли, который готовят путем кипячения соли в воде до тех пор, пока она не перестанет растворяться. Раствор про­цеживают через марлю и используют после охлаждения до комнат­ной температуры.

Берут 5—8 г (можно и больше) фекалий, поме­щают в фарфоровую ступку и заливают небольшим количеством раствора соли. Затем после тщательного растирания фекалий в смесь добавляют 150—200 мл (можно 100—140 мл) раствора и проце­живают через сито в сухой и чистый стакан, размешивая стеклянной палочкой.

Взвесь отстаивают 10—15 мин, затем с поверхности жид­кости с помощью петельки снимают пленку, переносят ее на пред­метное стекло для микроскопирования.

Некоторые модификации метода Фюллеборна имеют суще­ственные преимущества при диагностических исследованиях отдель­ных гельминтозов.

Метод Дарлинга.Этот метод сочетает осаждение и флотацию. Сначала проводят обычные исследовательские смывы. Затем оса­док 2—3 мин центрифугируют при 3000—4000 об/мин.

Верхний слой жидкости сливают, а к осадку добавляют смесь равных частей насы­щенного раствора поваренной соли и глицерина плотностью 1,205 кг/м3. Пробирку энергично встряхивают для тщательного смешивания содержимого и вновь центрифугируют.

Проволочной петлей сни­мают каплю с поверхности жидкости и исследуют под микроскопом. Метод чаще применяют при кишечных нематодозах.

Метод Щербовича.В качестве флотационных жидкостей можно использовать один из трех растворов: сульфат магния, тиосульфат натрия, нитрат натрия.

Фекалии величиной с грецкий орех кладут в стакан, добавляют 40—60 мл воды и размешивают стеклянной палочкой до получения однородной смеси. Если исследуемый объект твердой консистен­ции, его размешивают в ступке. Затем взвесь процеживают через металлическое сито в чистый стакан.

После отстаивания жидкость сливают, а осадок в объеме центрифужной пробирки центрифуги­руют 2—3 мин при 3000—4000 об/мин.

По окончании центрифугиро­вания надосадочную жидкость сливают, к осадку добавляют рас­творы сульфата магния (для диагностики метастронгилеза свиней), тиосульфата натрия или нитрата натрия (для диагностики макроканторинхоза свиней, спираратозов птиц и полиморфоза уток, тениидо-зов собак).

Осадок в пробирке размешивают стеклянной палочкой и опять центрифугируют в течение 1—2 мин при 1000—1500 об/мин. Затем петлей снимают поверхностную пленку, наносят ее на пред­метное стекло и микроскопируют.

Этот метод эффективен и при аскаридозах животных всех видов, стронгилятозах (желудочно-кишечных), трихоцефалезах, дикроцелиозе и аноплоцефалидозах.

Методы количественных овоскопических исследований.В неко­торых случаях требуется определить при жизни животных интенсив­ность их заражения с помощью различных камер и сеток (Мак-Мас­тера, Столла, Мак-Майера в модификации Ветцеля, Трача, Акбаева, Мигачевой и др.).

Кроме того, с целью определения эффективности проводимых лечебно-профилактических мероприятий пользуются стандартизи­рованными методами Фюллеборна, Щербовича и др.

Для этого уни­фицируют условия работы: во всех случаях исследований берут оди­наковое количество фекалий, идентичную посуду, отстаивают и центрифугируют пробы в течение одного и того же времени, пользуются петлями одинакового диаметра и подсчитывают яйца в одинаковом количестве полей зрения с одинаковым числом капель поверхностной пленки. Желательно проводить не менее чем в шести повторностях все исследования. Мы приводим простые, но доста­точно эффективные методы определения количества яиц и личи­нок.

По методу Столла в 100-миллилитровую колбочку наливают 56 мл воды и на уровне мениска снаружи делают отметку, потом доливают 4 мл воды и опять делают отметку. Затем воду выливают, а в колбу наливают 56 мл 0,1 н.

раствора едкого натра и добавляют фекалии так, чтобы уровень жидкости достигал верхней отметки — 60 мл. В колбу помещают 10—15 стеклянных бусинок и все тща­тельно взбалтывают.

Для определения количества яиц в 1 г (1 см3) фекалий сразу же после взбалтывания пипеткой набирают 0,075 мл

или лучше ОД мл смеси, наносят на предметное стекло и исследуют под микроскопом с помощью препаратоводителя. Выявленное количество яиц умножают на 200, если для исследования брали 0,075 мл, или на 150, если использовали 0,1 мл взвеси.

Так как подсчет яиц проводится без использования камеры, то точность определения их количества сомнительна.

Метод Акбаева.Данная методика подсчета яиц и мертвых личинок гельминтов наиболее проста и точна. Для этой цели легко гото­вят сетку из рентгеновских фотопленок. Для приготовления сетки требуются офицерская линейка, циркуль или швейные иглы и без­опасная бритва (лезвие).

Сначала пленку отмывают от эмульсии, затем четырехугольник линейки размером 40×17 мм размещают на куске пленки, иглой наносят едва заметные точки на расстоянии 1,6 мм друг от друга, с помощью линейки и лезвия чертят 11 гори­зонтальных и 26 вертикальных линий, которые иглой по краю сетки нумеруют.

Пленку с сеткой вырезают по размеру предметного стекла и при­клеивают канадским (!) бальзамом начерченной сеткой вверх. После высыхания бальзама сетка готова к длительному употребле­нию.

Для подсчета яиц берут 1—3 г фекалий и проводят исследования по методу последовательных смывов. Затем осадок энергично встряхивают и пипеткой с отпиленным кончиком набирают 0,1 мл взвеси и наносят на сетку.

Взвесь накрывают тонким предметным стеклом (толщина 1 мм), укороченным на 1 см.

Обнаруженное число яиц и личинок умножают на весь объем осадка в миллилит­рах, что составляет количественное выражение изучаемой массы

фекалий.

Сетку с успехом можно применять и для определения количества яиц гельминтов при использовании унифицированных методов фло­тации. В настоящее время при наличии тонких органических стекол не составляет труда начертить на них сетку, они экономичны и дол­говечны.

⇐ Предыдущая18192021222324252627Следующая ⇒

Date: 2015-07-02; view: 2207; Нарушение авторских прав

Источник: https://mydocx.ru/2-66212.html

Medic-studio
Добавить комментарий