Тема: “Серологическая диагностика сифилиса. Лечение.”

Тема: “Серологическая диагностика сифилиса. Лечение.”

Тема: “Серологическая диагностика сифилиса. Лечение.”

Диагностика:

  1. Под микроскопом( в темном поле)

  2. Серологическая

Приказ 11.61 от 2 сентября 1985года

Чуствительность теста =количество лиц с данным заболеванием/ с положительными результатами,

Специфичность теста = безданного заболевания / с отрицательнымиреакциями

группа . Отборочные реакциине дают право поставить диагноз. Реакциимикропреципитации передложил Овчиников- осадочная реакция с плазмой. Плазма +кардиолипиновые АГ преципитат. Исследуются все больныесоматического стационара, работникипищеблока, работники дошкольныхучреждений, группы риска.

Аналог ВДРЛ, РПР (быстрыеплазменные реагены)

  1. Диагностические реакции:

    1. КСР (комплексные серологические реакции)

      1. РСК (в термостате и на холоде)

      2. МОР с инактивированной сывороткой

    2. реакция Кана

КСР используется для

      1. диагностики всех форм сифилиса

      2. контроля эффективности лечения

      3. обследования половых контактов

      4. обследование больных психиатрических и неврологических стационаров

      5. все доноры

      6. беременные, и направляющиеся на аборт

РСК (Вассермана). (ПредложилиБорде и Жангу). В 1906 году Вассерман,Нессер и Брук применили для диагностикисифилиса реакцию основанную на феноменебактериолиза и гемолиза. Исследоваласьсыворотка + печень плода больногосифилисом.

В чистом виде Вассерман неиспользуется ее модифицировал в 1951 годуПэнгборн, разработав кардиолипиновыйантиген

компоненты:

        1. исследуемая сыворотка (5-6 мл взятые на тощак)

        2. АГ

          1. КАГ

          2. ультраозвученный трепонематозный АГ (УТАГ)

        3. комплемент морской свинки (в человеческой крови мало комплемента и он быстро инактивируется)

        4. гемолитическая сыворотка кролика (иммунизированного эритроцитами барана, содержащая гемолизин)

        5. эритроциты барана

исследуемая +сывороткаКАГ +УТАГкомплемент +гемолитическая +сывороткаэритроцитыбарана
Интерпритация данныхнет гемолиза4+ – резко ”+”3+ – положительный2+ – слабо “+”1+ – сомнительно(при этом комплемент связывает гемолизин и происходит задержка гемолиза)есть гемолиз (лаковая кровь)результат отрицательный

В 1909 году Боас предложилколичественную модификацию реакции,при этом сыворотка разбавлялась.

Титр – max разведение сывороткипри которой наблюдается полная (4+)задержка гемолиза (1:5, 1:10, 1:20, 1:40, 1:80,1:160, 1:320,).

Реакция Кана – ускореннаяосадочная реакция с АГ Кана

+ результаты диагностическихреакций при отсутствии клиники

    1. РИТ реакция иммобилизации трепонем(TPI). Предложили в 1949 году Нельсон, Майер. Оснрована на том ,что патогеннные тканевые трепонемы в присутствии комплемента теряют подвижность.

исследуемая сыворотка +взвесь патологической ткани взятой укролика больного сифилитическим орхитом+ комплемент

интерпритация результатовпо % обездвиженных трепонем

51- 100 % “+”

31-50 % слабо “+”

21-30 % сомнительный

0-20 % “-”

    1. РИФ- реакция иммунофлоресценции

Исследуемая сыворотка +взвесь убитых патогенных трепонем (АГ)= иммунный комплекс (ИК)

антивидовая сыворотка(антитела к IgM и IgG) меченная флуорисцином(ФИТЦ) = АТ.

ИК + АТ = Образуется новыйиммунный комплекс, который дает свечениев люминисцентном микроскопе (оценка по4+, 3+, 2+, 1+).

Разновидности РИФ :

      1. РИФабс сыворотка разводится в 5 раз становится положительной на 3-5 день после появления шанкра.

      2. РИФ200 сыворотка разводится в 200 раз (более специфична).

      3. РИФц – цельная спинномозговая жидкость.

РИФабс является стандартомпри первичном сифилисе специфичностьдостигает 70-100 %

    1. РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

1932 год Блюменталь, 1965 годРатпев.

      1. АГ насаживают на носитель (эритроциты барана предварительно обработанные танином или формалином)

      2. АГ – смесь бледной трепонемы

      3. исследуемая сыворотка

не используется для критериевизлеченности, но производится у доноров.

i) + ii) = (если есть АТ) аглютинацияэритроцитов и осаждение их в видезонтиков

    1. ИФА (иммуноферментный анализ) принцип такой же как и при РПГА

Используемые компоненты:УТАГ, исследуемая сыворотка, антивидоваясыворотка(фАТ к IgM[показателям свежегопроцесса] и IgG) меченая ферментом,специфический субстрат (S).

УТАГ + исследуемая сыворотка= новый иммунный комплекс (ИК)

(ИК + фАТ) + S = окрашивание

Серорезистентность.

Если в течение года послеокончания лечения позитивность и титрыне уменьшаются, то назначаетсядополнительное лечение. Если в течениигода наблюдается замедленнаясеронегативация, то это говорит онекачественном лечении. Неспецифическиереакции ложноположительные т. к. бледныетрепонемы расщепляют ткани больных собразованием липидных фракций .

При острых заболеваниях(до 6 месяцев) при беременности, инфарктемиокарда, гриппе, аденовирусной инфекции,малерии.

При хронических заболеваниях: лепра, коллагенозы, ревматизм,злокачественные новообразования,злокачественная гипертония, атеросклероз.

Неспецифичные реакции: прибеременности до 16 % ,при менструации,состоянии до и после родов, у людейстарше 60 лет, наркоманов, алкоголиков.

О неспецифичностисвидетельствует:

  • чаще слабоположительные (2-3 +), низкие титры 1:5, 1 : 10.
  • Изолированноположительные (в одном тесте +, в других -)
  • Колебание результатов при повторе (то + , то -)
  • Возраст старше 60 лет.
  • Соматическая отягощенность, наркомания.
  • Отсутствие порочащих связей.

Лечение.

Раньше использовалисьпрепараты висмута, ртути, мышьяка.

Препараты висмута используютсяс 1820 года. Бийохинол, бистоверол по 1,5мл 2 раза в неделю (до 20 мл) 1 мл – 0,05 г до 10 г на курс .

Осложнения:

  1. Висмутовая койма по зубному концу десен.

  2. Жировая эмболия.

  3. Стоматиты, гингивиты.

  4. Нефропатия (висмут в моче)

  5. Анемии, астении.

Rp: Kalii jodidi 100

Aqua destilatae 150 ml

S. По 1 столовой ложке 3 разав день после еды, запив молоком (3 г).

Таким образом за 20 дней – 60грамм.

Побочные эффекты:

  1. Конъюнктивит.

  2. Насморк – ринит.

  3. Отек языка, гортани.

  4. Расстройство желудочно-кишечного тракта.

  5. Йодистые угри.

Антибиотикотерапия.

  • Превентивное лечение.
  • Специфическое лечение.

Профилактическое ( еслимать болела во время беременности). Если за 1 год до беременности полученыотрицательные результаты реакций, топрофилактического лечения не проводят.

Если во время беременностиполучены положительные результатыреакций ,то проводят специфическоелечение матери и профилактическоелечение плода.

Если женщина заболелана поздних сроках беременности проводятспецифическое и профилактическоелечение. В качестве профилактики через6-7 мес. Калиевая и натриевая сольбензилпенициллина через 3 часа.Новокаиновая соль 3 раза в сутки.

Пенициллин 1 раз по 1,2 млн. ; 3 раза по 1,8млн.; 5 раз по 1,5 млн. В 0,25 % новокаина 2раза в неделю.

Источник: https://studfile.net/preview/1778476/page:22/

Лекция № 12. Тема: “Серологическая диагностика сифилиса

Тема: “Серологическая диагностика сифилиса. Лечение.”

Тема: “Серологическая диагностика сифилиса. Лечение.”

Диагностика:

1. Под микроскопом( в темном поле)

2. Серологическая

Приказ 11.61 от 2 сентября 1985 года

Чуствительность теста = количество лиц с данным заболеванием / с положительными результатами,

Специфичность теста = без данного заболевания / с отрицательными реакциями

группа . Отборочные реакции не дают право поставить диагноз. Реакции микропреципитации передложил Овчиников – осадочная реакция с плазмой. Плазма + кардиолипиновые АГ Þ преципитат. Исследуются все больные соматического стационара, работники пищеблока, работники дошкольных учреждений, группы риска.

Аналог ВДРЛ, РПР (быстрые плазменные реагены)

3. Диагностические реакции:

a) КСР (комплексные серологические реакции)

i) РСК (в термостате и на холоде)

ii) МОР с инактивированной сывороткой

b) реакция Кана

КСР используется для

i) диагностики всех форм сифилиса

ii) контроля эффективности лечения

iii) обследования половых контактов

iv) обследование больных психиатрических и неврологических стационаров

v) все доноры

vi) беременные, и направляющиеся на аборт

РСК (Вассермана). (Предложили Борде и Жангу). В 1906 году Вассерман, Нессер и Брук применили для диагностики сифилиса реакцию основанную на феномене бактериолиза и гемолиза. Исследовалась сыворотка + печень плода больного сифилисом.

В чистом виде Вассерман не используется ее модифицировал в 1951 году Пэнгборн, разработав кардиолипиновый антиген

компоненты:

a) исследуемая сыворотка (5-6 мл взятые на тощак)

b) АГ

(1) КАГ

(2) ультраозвученный трепонематозный АГ (УТАГ)

c) комплемент морской свинки (в человеческой крови мало комплемента и он быстро инактивируется)

d) гемолитическая сыворотка кролика (иммунизированного эритроцитами барана, содержащая гемолизин)

e) эритроциты барана

исследуемая + сыворотка КАГ + УТАГ комплемент + гемолитическая + сыворотка эритроциты барана
Интерпритация данных нет гемолиза 4+ – резко ”+” 3+ – положительный 2+ – слабо “+” 1+ – сомнительно (при этом комплемент связывает гемолизин и происходит задержка гемолиза) есть гемолиз (лаковая кровь) результат отрицательный

В 1909 году Боас предложил количественную модификацию реакции, при этом сыворотка разбавлялась.

Титр – max разведение сыворотки при которой наблюдается полная (4+) задержка гемолиза (1:5, 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320,).

Реакция Кана – ускоренная осадочная реакция с АГ Кана

3. Специфические реакции.

+ результаты диагностических реакций при отсутствии клиники

a) РИТ реакция иммобилизации трепонем(TPI). Предложили в 1949 году Нельсон, Майер. Оснрована на том ,что патогеннные тканевые трепонемы в присутствии комплемента теряют подвижность.

исследуемая сыворотка + взвесь патологической ткани взятой у кролика больного сифилитическим орхитом + комплемент

интерпритация результатов по % обездвиженных трепонем

51- 100 % “+”

31-50 % слабо “+”

21-30 % сомнительный

0-20 % “-”

b) РИФ- реакция иммунофлоресценции

Исследуемая сыворотка + взвесь убитых патогенных трепонем (АГ) = иммунный комплекс (ИК)

антивидовая сыворотка (антитела к IgM и IgG) меченная флуорисцином (ФИТЦ) = АТ.

ИК + АТ = Образуется новый иммунный комплекс, который дает свечение в люминисцентном микроскопе (оценка по 4+, 3+, 2+, 1+).

Разновидности РИФ :

i) РИФабс сыворотка разводится в 5 раз становится положительной на 3-5 день после появления шанкра.

ii) РИФ200 сыворотка разводится в 200 раз (более специфична).

iii) РИФц – цельная спинномозговая жидкость.

РИФабс является стандартом при первичном сифилисе специфичность достигает 70-100 %

c) РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

1932 год Блюменталь, 1965 год Ратпев.

i) АГ насаживают на носитель (эритроциты барана предварительно обработанные танином или формалином)

ii) АГ – смесь бледной трепонемы

iii) исследуемая сыворотка

не используется для критериев излеченности, но производится у доноров.

i) + ii) = (если есть АТ) аглютинация эритроцитов и осаждение их в виде зонтиков

d) ИФА (иммуноферментный анализ) принцип такой же как и при РПГА

Используемые компоненты: УТАГ, исследуемая сыворотка, антивидовая сыворотка(фАТ к IgM[показателям свежего процесса] и IgG) меченая ферментом, специфический субстрат (S).

УТАГ + исследуемая сыворотка = новый иммунный комплекс (ИК)

(ИК + фАТ) + S = окрашивание

Серорезистентность.

Если в течение года после окончания лечения позитивность и титры не уменьшаются, то назначается дополнительное лечение. Если в течении года наблюдается замедленная серонегативация, то это говорит о некачественном лечении. Неспецифические реакции ложноположительные т. к. бледные трепонемы расщепляют ткани больных с образованием липидных фракций .

При острых заболеваниях (до 6 месяцев) при беременности, инфаркте миокарда, гриппе, аденовирусной инфекции, малерии.

При хронических заболеваниях : лепра, коллагенозы, ревматизм, злокачественные новообразования, злокачественная гипертония, атеросклероз.

Неспецифичные реакции: при беременности до 16 % ,при менструации, состоянии до и после родов, у людей старше 60 лет, наркоманов, алкоголиков.

О неспецифичности свидетельствует:

· чаще слабоположительные (2-3 +), низкие титры 1:5, 1 : 10.

· Изолированноположительные (в одном тесте +, в других -)

· Колебание результатов при повторе (то + , то -)

· Возраст старше 60 лет.

· Соматическая отягощенность, наркомания.

· Отсутствие порочащих связей.

Лечение.

Раньше использовались препараты висмута, ртути, мышьяка.

Препараты висмута используются с 1820 года. Бийохинол, бистоверол по 1,5 мл 2 раза в неделю (до 20 мл) Þ 1 мл – 0,05 г до 10 г на курс .

Осложнения:

1. Висмутовая койма по зубному концу десен.

2. Жировая эмболия.

3. Стоматиты, гингивиты.

4. Нефропатия (висмут в моче)

5. Анемии, астении.

Rp: Kalii jodidi 100

Aqua destilatae 150 ml

S. По 1 столовой ложке 3 раза в день после еды, запив молоком (3 г).

Таким образом за 20 дней – 60 грамм.

Побочные эффекты:

1. Конъюнктивит.

2. Насморк – ринит.

3. Отек языка, гортани.

4. Расстройство желудочно-кишечного тракта.

5. Йодистые угри.

Антибиотикотерапия.

· Превентивное лечение.

· Специфическое лечение.

Профилактическое ( если мать болела во время беременности). Если за 1 год до беременности получены отрицательные результаты реакций, то профилактического лечения не проводят.

Если во время беременности получены положительные результаты реакций ,то проводят специфическое лечение матери и профилактическое лечение плода.

Если женщина заболела на поздних сроках беременности проводят специфическое и профилактическое лечение. В качестве профилактики через 6-7 мес. Калиевая и натриевая соль бензилпенициллина через 3 часа. Новокаиновая соль 3 раза в сутки.

Пенициллин 1 раз по 1,2 млн. ; 3 раза по 1,8 млн.; 5 раз по 1,5 млн. В 0,25 % новокаина 2 раза в неделю.

23/05/97

Источник: https://studopedia.su/10_144177_lektsiya--.html

Серологическая диагностика сифилиса

Тема: “Серологическая диагностика сифилиса. Лечение.”

Основной методологией диагностики сифилиса являются непрямые серологические методы, определяющие присутствие антител в сыворотке, цельной крови и спинномозговой жидкости пациента, инфицированного бледной трепонемой. Важность серологической диагностики сифилиса обусловлена следующими факторами:

– серологические реакции являются единственным диагностическим инструментом при постановке диагноза скрытого сифилиса;

– серологические реакции являются единственным критерием эффективности лечения;

– серологические реакции являются решающими для юридического оформления диагноза при манифестных формах сифилиса.

Серологические методы диагностики делятся на нетрепонемные и трепонемные. Принципиально процедура серологической диагностики сифилиса основана на одновременном использовании нетрепонемных и трепонемных тестов. В соответствии с приказом М3 РФ №87 2001 г.

«О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» виды серологических реакций, рекомендуемые для практического использования, строго регламентированы.

Результаты серологических реакций могут быть качественными — положительный (+) или отрицательный (-) и полуколичественными, позволяющими судить об относительном количестве антител.

Устанавливается это путем визуального определения титра антител или инструментально — по оптической плотности образцов с расчетом коэффициента позитивности.

Очевидно, что оба метода позволяют сделать лишь приблизительные оценки, поскольку не учитывается ряд факторов, как, например, аффинность антител и различие спектров классов антител в конкретном образце. Однако, по сравнению с ранее существующими методами визуального учета титров антител (РСК), данный подход имеет значительные преимущества.

Титр антител устанавливается путем последовательных двукратных разведений сыворотки, давшей положительную реакцию. Титр показывает наибольшее разведение, сохраняющее позитивность.

Коэффициент позитивности рассчитывается, как частное отделения оптической плотности исследуемого образца на критическую плотность. Критическая плотность — это среднее значение оптической плотности отрицательного контроля с учетом дополнительных коэффициентов, взятых из приложенной инструкции.

Различия показателей оптической плотности в пределах 0,8-0,9 до 1,1-1,2 от значения критической называют «серой зоной». Значения, расположенные выше этой зоны, оцениваются, как положительные, а ниже, — как отрицательные.

Любой первоначально полученный сомнительный или положительный результат серологического исследования на сифилис подлежит обязательному повторению через 7-10 дней с новой порцией крови.

а) Нетрепонемные реакции позволяют определять так называемые ранние антитела (реагины) против липидных антигенов, которые являются общими для бледной трепонемы и для тканей хозяина (организма человека). Реактивность нетрепонемных тестов может быть следствием не только присутствия в организме возбудителя сифилиса, но и повреждения тканей хозяина.

И хотя нетрепонемные реакции не всегда специфичны в отношении сифилиса, простота выполнения способствовала их широкому применению в качестве отборочных для установления предварительного диагноза сифилиса.

Нетрепонемные тесты используются для первичного скрининга (отбора), оценки качества проведенного лечения, а также дифференциального анализа положительных результатов трепонемных реакций.

К реакциям этого типа относятся: реакция микропреципитации (РМ11), быстрый плазмореагиновый тест (RPR, VDRL – Veneral Disease Research Laboratory, англ.) и др.

Реакция микропреципитации (РМП) основана на образовании осадка (преципитата), образующегося при добавлении к плазме или сыворотке больного сифилисом эмульсии препарата кардиолипинового антигена, выпадающего в виде хлопьев беловатого цвета.

Быстрый плазмореагиновый тест (RPR) относится к флокуляционным, он определяет наличие в крови больного антител к кардиолипину, холестерину и лецитину, сорбированным на мелкодисперсных частицах угля.

Результаты теста определяются по агрегации черных частиц угля. Преимуществом RPR-теста является то, что он наиболее стандартизирован, это позволяет получать стабильные, воспроизводимые и сравнимые результаты.

Чувствительность RPR-теста при первичном сифилисе — 85%, вторичном — 100%, раннем скрытом — 98%, позднем — 95%.

Нетрепонемные тесты выполняются в полуколичественном варианте и являются весьма важным, а при скрытых формах единственным критерием эффективности проведенного лечения: уменьшение титра антител в 4 и более раз в течение года является признаком эффективного лечения. У 95-98% больных ранними формами сифилиса в разные сроки после адекватного лечения нетрепонемные тесты становятся стойко отрицательными.

В течение почти 70 лет основным инструментом для серологической диагностики сифилиса в Советском Союзе служила реакция связывания комплемента (РСК) с кардиолипиновым (реакция Вассермана — РВ) и трепонемным антигенами.

Вместе с реакцией микропреципитации (РМП) оба вида РСК были объединены в так называемый «комплекс серологических реакций» — КСР. При первичном сифилисе РВ становится положительной на 6-й неделе заболевания у 25-50% больных, а на 7-8-й неделе — у 75-90%.

Мри вторичном сифилисе у подавляющего числа больных (98-100%) регистрируется положительная РВ.

В последующие сроки в зависимости от длительности заболевания позитивность серологических реакций убывает: при раннем скрытом сифилисе — 90-95%, позднем — 80%, третичном — 60-70%.

Однако РСК обладает и достаточно существенными недостатками: низкая чувствительность и специфичность; технологические трудности; невозможность стандартизации диагностического процесса и как следствие плохая воспроизводимость результатов; субъективизм при оценке результатов реакции; зависимость результатов не только от профессионального, но и психоэмоционального состояния технического персонала и т.д.

Поэтому начиная с 2006 г. реакция Вассермана выведена из комплекса скрининговых и диагностических реакций на сифилис. Из нетрепонемных реакций для этих целей оставлены реакция микропреципитации (РМП) или плазмореагиновый тест (RPR).

Однако положительные результаты только нетрепонемных тестов не могут быть основанием для постановки диагноза сифилиса, их необходимо подтверждать данными трепонемных реакций.

Это связано с тем, что при определенных состояниях организма (системные и онкологические заболевания, беременность, туберкулез, обширные раневые инфекции и т.д.) нетрепонемные реакции могут быть положительными при отсутствии специфической инфекции.

Эти так называемые биологические ложно-положительные реакции на сифилис отличить от истинных можно только при помощи трепонемных реакций.

б) Трепонемные реакции позволяют определять антитела к антигенам бледной тренонемы, в связи с чем данные реакции являются более специфичными и чувствительными. К трепонемным реакциям относятся: реакции непрямой гемагглютинации (РИГА), иммуноферментный анализ (ИФА) и реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Наиболее стандартизированными, воспроизводимыми, высокочувствительными и специфичными являются РИГА и ИФА. Реакции этого типа являются обязательными для подтверждения диагноза, но могут применяться и в качестве отборочных.

После проведенного лечения трепонемные тесты могут сохранять позитивность в течение долгого времени, а иногда в течение всей жизни.

Поэтому для понимания ситуации (новое заражение, состояние после лечения) одновременно с трепонемными применяются и нетрепонемные тесты.

Реакция непрямой гемагглютинации. Это трепонемный тест, предназначенный для выявления в сыворотке крови специфических антител к антигенам бледной трепонемы методом гемагглютинации.

Принцип метода заключается в агглютинации птичьих эритроцитов, сенсибилизированных антигенами бледной трепонемы (штамм Никольс), специфическими противотрепонемными антителами испытуемой сыворотки. При первичном сифилисе реактивность РНГА наступает несколько позже, чем нетрепонемного РПР-теста.

При вторичном, скрытом и позднем сифилисе чувствительность и специфичность РНГА приближается к 100%. Имеется возможность автоматизации лабораторного процесса и объективизации полученных данных.

В настоящее время выпускается оборудование, обеспечивающее автоматизированный анализ изображений РНГА с возможностью их количественной оценки, визуализации на мониторе и архивирования.

После адекватного лечения РНГА может сохранять реактивность в течение длительного времени, а иногда пожизненно.

Результаты РНГА определяются, как «положительный/отрицательный», указание титров положительных реакций не является обязательным.

Иммуноферментный анализ. Принцип реакции заключается в том, что к образованному комплексу антиген (нанесен на твердофазный носитель)-антитело (испытуемая сыворотка) добавляют антитела к иммуноглобулинам человека, конъюгированные с ферментными маркерами.

В случае положительной реактивности присоединившийся к комплексу антиген-антитело фермент разлагает добавленный в систему субстрат с образованием цветной реакции различной интенсивности. Это так называемый непрямой метод ИФА.

Помимо него существуют ловушечные методы для суммарного и раздельного определения иммуноглобулинов.

Метод ИФА обладает высокими чувствительностью и специфичностью, может быть автоматизирован и использоваться одновременно для обследования больших контингентов. Результат реакции выражают как «положительный» или «отрицательный», указание титра реакции не обязательно, поскольку изменение этого показателя не является критерием эффективности лечения.

Реакция иммунофлюоресценции. Антигеном в этой реакции являются живые патогенные трепонемы штамма Никольса. Зафиксированный на стекле антиген обрабатывается исследуемой сывороткой.

В отличие от ИФА в этой реакции специфический комплекс антиген-антитело обрабатывают антителами, меченными флюорохромом, которые направлены против иммуноглобулинов человека. При просмотре в люминесцентном микроскопе образующийся комплекс антиген-антитело дает характерное свечение, по степени которого судят о позитивности реакции.

Наиболее чувствительным является вариант РИФабс, т.е. использование сыворотки, предварительно обработанной сорбентом для удаления групповых антител.

РИФ считается одной из лучших диагностических реакций на сифилис, что обусловлено высокими показателями чувствительности, специфичности, а также возможностью эффективного использования на протяжении всего времени развития инфекции.

Безусловным достоинством РИФ является возможность определения трепонемоспецифических IgM, относящихся к ранним маркерам инфекции; их появление может быть зафиксировано уже в инкубационном периоде.

Но наибольшее значение имеет определение IgM для диагностики врожденного сифилиса: наличие трепонемоспецифических IgM в крови ребенка свидетельствует о врожденном сифилисе, так как подобные иммуноглобулины матери не проникают через плацентарный барьер.

РИФ применяется также для дифференциальной диагностики ложноположительных реакций и ретроспективной оценки перенесенной инфекции.

Изменение позитивности серологических реакций в различные периоды развития сифилитической инфекции.

в) Подтверждение серологических тестов на сифилис.

Последним достижением в серологической диагностике сифилиса является реакция линейного иммуноблоттинга, которая используется для подтверждения положительных результатов трепонемных тестов (ИФА, РИГА, РИФ).

Реакция позволяет полуколичественно оценить интенсивность антительного ответа (антитела классов IgG, IgM) к отдельным иммунодоминантным эпитопам бледной трепонемы:

– TpN47, TpN17, TpN15 — пептиды Т. pallidum штамма Никольса, экспрессированные в Е. coli;

– TmpA — синтетический пептид трансмембранного белка А.

Указанные антигены вместе с иммобилизованными IgG человека (контроль) нанесены на полоски целлюлозы. Для исследования используется сыворотка или плазма в объеме 10 мкл.

После инкубации в течение 12-16 ч при комнатной температуре результаты реакции выявляют при помощи иммуноферментного анализа с использованием сыворотки против IgG человека, меченной щелочной фосфатазой. Для оценки результатов сравнивают интенсивность окрашенных линий антигенов с контролем.

Линейный иммуноблоттинг демонстрирует наиболее высокие показатели чувствительности и специфичности во всех периодах сифилиса. Очевидно, что это один из наиболее высокочувствительных и специфичных из известных в настоящее время трепонемных тестов.

По аналогии с ВИЧ-инфекцией и вирусными гепатитами предполагается использовать данный тест как подтверждающий, в том числе для диагностики врожденного сифилиса, сифилиса у беременных, больных коллагенозами, онкологических больных, при расхождении результатов трепонемных тестов, а также в случаях, требующих специальных экспертных оценок.

Трудности серологической диагностики сифилиса связаны с рядом обстоятельств. Следует иметь в виду, что положительная реактивность трепонемных и нетрепонемных тестов еще не является окончательным решением вопроса диагноза сифилис.

Положительные тесты на сифилис могут быть вызваны иными причинами (заболеваниями); кроме того, они могут свидетельствовать о перенесенной в прошлом и пролеченной инфекции. Это особенно важно при диагностике скрытых форм сифилиса, когда данные серологических исследований являются решающими для постановки диагноза.

С другой стороны, отрицательная реактивность не всегда означает отсутствие инфекции в организме.

Данная ситуация — достаточно редкая, она может возникнуть как на самых ранних этапах развития инфекции (период инкубации), так и при поздних формах.

Во избежание диагностических ошибок, связанных с ложноположительными и отрицательными результатами, на практике одновременно используют не одну, а несколько серологических реакций.

Необходимость подобного подхода объясняется тем, что, с одной стороны, диагностические реакции, связанные с идентификацией инфекционных агентов, характеризуются неодинаковой чувствительностью и специфичностью, а с другой, — образование различных классов иммуноглобулинов (антител) происходит не одновременно.

г) Методы экспресс диагностики сифилиса. Экспресс методами диагностики сифилиса являются методы прямого обнаружения бледной трепонемы — микроскопия в темном поле и прямая иммунофлюоресценция, а также серологические нетрепонемные методы — реакция микропреципитации (РМП), плазмореагиновый тест (RPR), реакции типа VDRL

– Читать далее “Лечение и профилактика сифилиса”

Редактор: Искандер Милевски. 5.2.2020

Оглавление темы “Спирохеты. Возбудитель сифилиса (Treponema pallidum).”:

Источник: https://dommedika.com/medicinskaia_mikrobiologia/serodiagnostika_sifilisa.html

Medic-studio
Добавить комментарий